Avaliação do efeito da epigalocatequina-3-galato na instabilidade genômica de células humanas HepG2 cultivadas em três dimensões (3D)

• Processo: 14/12262-2
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2014
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2016
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Mutagênese
• Pesquisador responsável: Lusânia Maria Greggi Antunes
• Beneficiário: Lusânia Maria Greggi Antunes
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (FCFRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Genotoxicidade Cultura de células Ensaio cometa Instabilidade genômica Epigalocatequina-3-galato
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: cultura celular | ensaio cometa | Genotoxicidade | instabilidade genômica | Métodos Alternativos | Quimiopreventivo | Mutagênese

Resumo

A utilização do princípio dos 3 Rs (Reduction, Refinement, Replacement) foi proposta como uma alternativa para substituir a utilização de animais em pesquisa, reduzir ao mínimo o número utilizado; e aperfeiçoar o delineamenteo experimental com o objetivo de causar o mínimo de dor possível. A importância da aplicação de novos métodos alternativos à utilização de animais tem levado a criação de novos métodos in vitro. Tem sido sugerido que os modelos de cultura celular tridimensional (3D) de esferoides multicelulares, em contraste com a cultura convencional plana bidimensional (2D), representam de forma mais exata o microambiente tumoral. Estudos têm proposto que o potencial quimiopreventivo de compostos bioativos da dieta está relacionado aos seus efeitos na instabilidade genômica por meio da manutenção de eventos epigenéticos como a metilação do DNA e modificação de histonas. As marcas epigenéticas e as enzimas que as estabelecem estão envolvidas em vários mecanismos relacionados à integridade do genoma. Muitos estudos tem evidenciado a atividade antitumoral da epigalocatequina-3-galato por meio de alterações epigenéticas em cultura convencional 2D. No entanto, não há estudos demonstrando os efeitos epigenéticos da epigalocatequina-3-galato em cultura celular 3D. Com isso, o objetivo deste projeto de pesquisa é avaliar a atividade da epigalocatequina-3-galato sobre a integridade morfológica e celular de esferoides multicelulares tumorais, sobre a migração e invasão celular tridimensional e instabilidade genômica por meio de alterações epigenéticas de genes e proteínas envolvidas na proliferação celular em cultura de células HepG2 em 3D no modelo de esferoides multicelulares tumorais. (AU)