Ataque molecular ao controle da proliferação celular e origem de neoplasias

• Processo: 95/09344-4
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Temático
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 1996
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2003
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Mari Cleide Sogayar
• Beneficiário: Mari Cleide Sogayar
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Auxílio(s) vinculado(s): 00/02134-4 - Identification and characterization of glucocorticoid-regulated sequences using equalizing cdna subtraction based on selective suppression of polymerase chain reaction., AR.EXT; 99/10655-5 - José Mauro Granjeiro | Faculdade de Odontologia de Bauru/USP - Brasil, AV.BR; 99/04005-8 - Cloning and characterization of glucocorticoid-regulated sequences using equalizing cdna subtraction based on selective suppresion of polymerase chain reaction., AR.EXT; + mais auxílios vinculados 97/13971-0 - Tony Hunter | Salk Institute - Estados Unidos, AV.EXT; 98/01091-8 - Mapping of polyomavirus middle t domain that is responsible for ap-1 activation., PUB.ART; 97/03523-0 - Cloning of glycocorticoid - regulated sequences using suppression of polymerase chain reaction., AR.EXT; 96/06107-4 - Claudio Antonio Pinho Joazeiro | Howard Hughes Medical Institute Research Laboratories - Estados Unidos, AV.EXT - menos auxílios vinculados
• Bolsa(s) vinculada(s): 02/07203-0 - Análise funcional de genes regulados por ácido retinóico na reversão fenotípica (tumoral-normal) de células C6/ST1 de glioma de rato, BP.PD; 01/12122-6 - Clonagem e caracterização de genes diferencialmente expressos durante a diferenciação de células tronco (stem cells) em células secretoras de insulina, BP.DD; 01/11586-9 - Clonagem de genes regulados pelo antígeno MT do vírus polioma e estresse oxidativo na transformação maligna de células BALB-3T3, BP.DD; + mais bolsas vinculadas 01/12286-9 - Papel dos genes supressores de tumor RECK e p53 na reversão fenotípica tumoral-normal induzida por hormônios glicocorticóides em células ST1 de glioma de rato, BP.DD; 02/00001-2 - Isolamento de ilhotas pancreáticas de ratos para uso em ensaios funcionais de ilhotas pancreáticas humanas em ratos, BP.TT; 00/06043-3 - Papel de elementos de matriz extracelular na proliferacao, adesao e funcionalidade de celulas beta da linhagem hit-t15 de hamster e de ilhotas pancreaticas humanas., BP.IC; 00/04650-0 - Identificacao de genes diferencialmente expressos em tumores de prostata atraves de microarranjos de cdnas., BP.PD; 00/03818-4 - Isolamento e caracterizacao de genes diferencialmente expressos em insulinomas (adenomas) humanos., BP.DR; 00/01021-1 - Regulação transcricional do gene supressor de tumor RECK, BP.PD; 00/01638-9 - Análise temporal da expressão dos receptores de ácido retinóico durante a reversão fenotípica de células C6/ST1 de glioma de rato, BP.IC; 99/11494-5 - Papel dos componentes da matriz extracelular na proliferação, diferenciação e função de ilhotas pancreáticas humanas, BP.PD; 99/00106-4 - Microencapsulamento e avaliacao funcional "in vitro e "in vivo" de ilhotas pancreaticas humanas., BP.DR; 99/05925-3 - Obtenção de cultura de células beta humanas a partir de culturas pancreáticas primárias, BP.IC; 99/01061-4 - Isolamento, purificação, criopreservação e encapsulamento de ilhotas pancreáticas humanas para transplante em pacientes diabéticos, BP.TT; 98/11635-5 - Gene transportador de trealose em células pancreáticas, BP.IC; 98/05886-5 - Isolamento, purificação, criopreservação e caracterização de ilhotas pancreáticas humanas, BP.TT; 98/04485-7 - Caracterização e uso de antisoros policlonais contra os produtos dos proto-oncogenes Fos e Jun, BP.IC; 96/06750-4 - Analise do papel de proto-oncogenese e genes supressores de tumor no controle da proliferacao e neoplasia usando oligonucleotideos antisense e antisoros especificos., BP.PD - menos bolsas vinculadas
• Assunto(s): Neoplasias
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Clonagem De Cdnas | Hormonios Glucocorticoides | Reversao Tumoral - Normal | Transformacao Maligna Celular | Virus Tumoral Polioma

Resumo

A proliferação celular normal é controlada por reguladores extracelulares (hormônios clássicos peptídicos e esteroídicos) e fatores peptídicos de crescimento. Dois tipos principais de produtos gênicos participam da resposta celular a estes reguladores extracelulares, os produtos de oncogenes e de genes supressores de tumor. Alterações destes produtos levam ao aparecimento de tumores (neoplasias). O Objetivo Geral deste projeto é esclarecer as bases moleculares do fenômeno de reversão fenotípica (tumoral-normal) induzido por hormônios glucocorticoides em células C6/STl de glioma de rato e da transformação malígna causada pelo oncogene "midlle T" (MT) de poliomavírus em células 3T3 de camundongo. Três objetivos específicos são propostos: 1. análise dos genes regulados por glucorticoides nas células C6/STl, por clonagem molecular, utilizando hibridização diferencial, "differential display of RNA", entre outras técnicas; caracterização estrutural e funcional dos cDNAs isolados e teste do papel de seus produtos gênicos na reversão fenotípica por interferência (uso de oligonucleotídeos antisense nas células C6/8Tl) e super-expressão (nas células C6/P7 que não sofrem a reversão fenotípica). Análise da expressão de oncogenes e genes supressores de tumor, a nível de RNA e/ou proteína utilizando sondas e antisoros específicos. 2. análise das alterações moleculares provocadas por MT de poliomavírus, particularmente na expressão dos genes de resposta primária a fatores peptídicos de crescimento (proto-oncogenes c-fos, c-jun, c-myc, c-rei; interleucinas JE, KC) e da ínteração de MT com proteínas celulares envolvidas na transdução do sínal proliferativo. 3. produção de oncoproteínas recombinantes (membros das famílias Fos e Jun, supressor de tumor RB, produtos de genes regulados por glucocorticoides) em vetores de expressão de procariotos (bactéria) e de eucariotos (baculovirus/células de inseto) para a geração de anti-soros específicos. Espera-se poder contribuir para ampliar o conhecimento sobre as bases moleculares da transformação malígna induzida por vírus tumorais e do efeito anti tumoral de hormônios glucocorticoides. O enfoque molecular adotado poderá gerar novos "insights" no desenho de drogas repressoras da divisão celular que poderiam atuar na terapia tumoral. (AU)