Resumo
Este Projeto Temático, composto por 3 grupos de Sub-Projetos, inclui 29 Sub-Projetos de Pesquisa envolvendo 3 pesquisadores principais e cerca de 55 colaboradores brasileiros e internacionais. Terá duração de 4 anos. O projeto tem por foco Bunyaviridae de 3 gêneros:Orthobunyavirus, Phlebovirus e Hantavirus, todos eles zoonóticos e emergentes, ou potencialmente emergentes no Brasil. Quanto aos Orthobunyavirus,realizaremos diagnóstico sorológico de infecções por vírus Oropouche (OROV) por ELISA utilizando uma proteína N recombinante de OROV como antígeno. Com este teste, realizaremos inquérito soro-epidemiológico para OROV em soros de pacientes com doença febril aguda, cavalos, pequenos mamíferos e pássaros. Como informação preliminar para uma vacina, testaremos a proteína N recombinante de OROV, como imunógeno em camundongos. Também, testaremos a ação anti-OROV de 10.000 compostoscom base no efeito citopático em células e sua inibição pelas drogas. Produziremos um OROV fluorescente para estudos in vivo e estudaremos sua proteína NSs. Estudaremos a filogenia e a epidemiologia molecular dos Orthobunyavirus com base em genomas virais completos determinados por sequenciamento de nova geração. Ainda, desenvolveremos RT-PCR em tempo real para Orthobunyavirus brasileiros com evidência no sorogrupo C e no sorogrupo Simbu.Quanto aos Phlebovirus, estes serão estudados quanto à filogenia e a epidemiologia molecular. Desenvolveremos RT-PCR em tempo real para Phlebovirus. Buscaremos detectar infecções por Phlebovirus em amostras clínicas de pacientes com doença febril aguda. Também, testaremos a ação contra vírus Candirú (CANDV) de 10.000 compostos. Desenvolveremos um modelo experimental de infecção por CANDV. Quanto aos Hantavirus, diagnosticaremos e pesquisaremos o vírus infectante em doentes com a Síndrome Pulmonar e Cardiovascular por Hantavirus (SPCVH). Analisaremos aspectos da fisiopatologia da SPCVHcom base em teores de citocinas séricas. Caracterizaremosgeneticamente e morfologicamente o Hantavirus Araraquara (ARQV).Avaliaremos a capacidade imunogênica da proteína N recombinante do ARQV em camundongos. Testaremos a ação contra Hantavirus de 10.000 compostos. Realizaremos captura de pequenos mamíferos no campo e pesquisaremos a infecção por Hantavírus nestes animais e em seus ectoparasitas.Analisaremos a infecção por Hantavirus em Necromys lasiurus infectados em laboratório e em suas excretas. Realizaremos estudo de epidemiologia molecular, com base em análises computacionais, sobre a evolução e a distribuição geográfica dos Hantavírus brasileiros. Ainda, esperamos com nossos estudos de bilogia celular, reconhecer detalhes da montagem e do brotamento dos Hantavirus em sua replicação. (AU)
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