Estudos funcionais da tirosina quinase Fibroblast Growth Factor receptor (FGFR2), da adaptadora growth factor Receptor- bound protein 2 (GRB2) e da tirosina fosfatase SHP2

• Processo: 14/17630-0
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2015
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 2017
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Biofísica - Biofísica Molecular
• Pesquisador responsável: Fernando Alves de Melo
• Beneficiário: Fernando Alves de Melo
• Instituição Sede: Instituto de Biociências, Letras e Ciências Exatas (IBILCE). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de São José do Rio Preto. São José do Rio Preto , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Antonio José da Costa Filho ; Fátima Pereira de Souza ; Marcelo Andrés Fossey
• Assunto(s): Cinética Calorimetria Receptores de fatores de crescimento de fibroblastos Metabolismo celular Proteínas tirosina quinases Fosforilação
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: calorimetria | Cinética | fluorescência | fosforilação | Interação | mudança conformacional | Biofísica

Resumo

O metabolismo celular é mediado por vias de sinalização que são reguladas por atividades enzimáticas dependentes da fosforilação reversível da cadeia lateral de aminoácidos. Deste modo, as proteínas tirosina quinase (PTKs) exercem um papel fundamental na regulação do metabolismo, expressão gênica, crescimento, divisão e diferenciação celular. Uma vez fosforiladas, PTKs recrutam proteínas parceiras (Grb2, Shc, Ras, Sos, etc) para formar complexos de sinalização primários (ESCs), que ativam vias de sinalização específicas dentro da célula. Em muitos casos quinases e fosfatases atuam juntas nestes processos. Neste contexto, as FGFRs são PTKs "chave" de muitos dos processos de sinalização cuja atividade aberrante causa uma variedade de cânceres e má formação fetal. Recentes estudos mostram que Grb2 é um importante regulador de FGFR2 e Shp2, prevenindo suas atividades quinase e fosfatase respectivamente antes da estimulação extracelular. Quando fosforilada, Grb2 dissocia-se de FGFR2, resultando no início de ambas as atividades quinase e fosfatase. A desfosforilação de Grb2 por Shp2 resgata o complexo formado previamente, reimpondo o controle sobre FGFR2. Grb2 é, portanto, uma reguladora global destas reações mutuamente dependentes e junto com FGFR2 e Shp2 é um alvo em potencial para o desenvolvimento de fármacos. Desta maneira, a caracterização das bases de interação entre estas proteínas são de suma importância para o entendimento dos processos que levam ao desenvolvimento de câncer. O objetivo deste trabalho é caracterizar as atividades quinase e fosfatase de FGFR2 e Shp2 respectivamente sobre Grb2 e posteriormente a interação mutua de FGFR2 e Shp2. Para este estudo serão obtidas proteínas recombinantes e o estudo será realizado utilizando técnicas de calorimetria e fluorescência para determinar parâmetros cinéticos de fosforilação e desfosforilação sobre Grb2, e possíveis mudanças conformacionais provenientes das interações mútuas entre estas proteínas.. Estes estudos contribuirão para que no futuro tenhamos uma "base" de conhecimento para o desenvolvimento de novos fármacos que vão atuar como inibidores de processos de sinalização celular que levam ao desenvolvimento de câncer. (AU)

Publicações científicas

(5)

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

SANCHES, KAROLINE; RODRIGUES DIAS, RAPHAEL VINICIUS; DA SILVA, PAULO HENRIQUE; FOSSEY, MARCELO ANDRES; CARUSO, ICARO PUTINHON; DE SOUZA, FATIMA PEREIRA; DE OLIVEIRA, LEANDRO CRISTANTE; DE MELO, FERNANDO ALVES. Grb2 dimer interacts with Coumarin through SH2 domains: A combined experimental and molecular modeling study. HELIYON, v. 5, n. 11, NOV 2019. (14/17630-0, 09/53989-4, 16/08753-6)

SANCHES, KAROLINE; CARUSO, ICARO P.; ALMEIDA, FABIO C. L.; MELO, FERNANDO A.. The dynamics of free and phosphopeptide-bound Grb2-SH2 reveals two dynamically independent subdomains and an encounter complex with fuzzy interactions. SCIENTIFIC REPORTS, v. 10, n. 1, AUG 3 2020. (14/17630-0)

TEDESCO, JESSICA A.; DIAS, RAPHAEL V. R.; CASTELUCI, GIOVANA; PEDRO, RENAN P.; DE OLIVEIRA, LEANDRO C.; CARUSO, ICARO P.; MELO, FERNANDO A.. The influence of pH on the structure and stability of the Grb2 dimer reveals changes in the inter-domain and molecular interaction: Could it be a modulation mechanism?. Biophysical Chemistry, v. 295, p. 11-pg., 2023-02-22. (14/17630-0, 19/24974-0)

SANCHES, KAROLINE; DIAS, RAPHAEL V. R.; DA SILVA, PAULO H.; CARUSO, ICARO P.; FOSSEY, MARCELO A.; DE SOUZA, FATIMA P.; DE OLIVEIRA, LEANDRO C.; MELO, FERNANDO A.. Thermodynamic profile and molecular modeling of the interaction between Grb2 dimer and flavonoids Rutin and Morin. Journal of Molecular Structure, v. 1234, p. 10-pg., 2021-03-06. (16/08753-6, 14/17630-0, 19/24974-0)

SANCHES, KAROLINE; CARUSO, ICARO P.; ALMEIDA, FABIO C. L.; MELO, FERNANDO A.. NMR assignment of free H-1, N-15 and C-13-Grb2-SH2 domain. BIOMOLECULAR NMR ASSIGNMENTS, v. 13, n. 2, p. 295-298, OCT 2019. (14/17630-0, 09/53989-4)