Desenvolvimento de uma ribonucleotídeo redutase recombinante de Lactobacillus leichmannii para a produção de desoxirribonucleotídeos trifosfato (dntps)

• Processo: 14/50381-3
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Pesquisa Inovativa em Pequenas Empresas - PIPE
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2015
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2016
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Enzimologia
• Pesquisador responsável: Maria Amélia Villela Oliva Dotta
• Beneficiário: Maria Amélia Villela Oliva Dotta
• Empresa: Cellco Biotec do Brasil Ltda
• Município: São Carlos
• Auxílio(s) vinculado(s): 16/50408-4 - Desenvolvimento de uma ribonucleotídeo redutase recombinante de Lactobacillus leichmannii para a produção de desoxirribonucleotídeos trifosfato (dNTPs), AP.PIPE
• Bolsa(s) vinculada(s): 15/09612-4 - Desenvolvimento de uma ribonucleotídeo redutase recombinante de Lactobacillus leichmannii para a produção de Desoxirribonucleotídeos trifosfato (dNTPS), BP.PIPE
• Assunto(s): Lactobacillus leichmannii Ribonucleotídeos Biocatálise Desoxirribonucleases
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Biocatalise De Ntps | Lactobacillus Leichmannii | Ribonucleotideo Redutase

Resumo

As etapas envolvidas nesse processo consistem em: amplificação e clonagem do gene da enzima LJRNR para construção de sistemas de expressão heteróloga em E. coli; testes de expressão e purificação em escala laboratorial, onde serão avaliados o perfil de expressão empregando diferentes vetores de expressão, cepas bacterianas e condições de expressão; caracterização da enzima recombinante produzida; otimização da reação de redução e produção de dNTPs. O resultado esperado para esta fase será a obtenção da proteína LIRNR de forma pura e ativa, através de protocolo padronizado, permitindo o desenvolvimento do processo de produção de dNTPs através da catálise da redução de ribonucleotídeos. A viabilização desse processo produtivo permitirá a comercialização de dNTPs, um reagente básico com elevado valor agregado (cerca de 1.000 vezes quando comparado ao custo da matéria prima). Além disso, sua disponibilidade com custos reduzidos facilitará a produção de uma série de análogos marcados com sondas fluorescentes, reagentes inovadores e com crescente demanda em pesquisa, a exemplo do desenvolvimento de fármacos inibidores de quinases. Propõe-se, portanto, contribuir para o processo de nacionalização da produção de reagentes básicos de biologia molecular, diminuindo custos e tempo de comercialização, essencial para o fortalecimento e competitividade da pesquisa no Brasil. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

GODOY, ANDRE S.; LIMA, GUSTAVO M. A.; OLIVEIRA, KETLLYN I. Z.; TORRES, NAIARA U.; MALUF, FERNANDO V.; GUIDO, RAFAEL V. C.; OLIVA, GLAUCIUS. Crystal structure of Zika virus NS5 RNA-dependent RNA polymerase. NATURE COMMUNICATIONS, v. 8, MAR 27 2017. (14/50381-3, 13/07600-3, 16/17153-2, 15/16811-3, 16/19712-9)