Heterogeneidades em arranjos lipídicos e protéicos: estudos por técnicas avançadas de fluorescência

• Processo: 14/26895-7
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Vigência: 01 de maio de 2015 - 30 de abril de 2017
• Área do conhecimento: Ciências Exatas e da Terra - Física - Física da Matéria Condensada
• Pesquisador responsável: Amando Siuiti Ito
• Beneficiário: Amando Siuiti Ito
• Instituição Sede: Faculdade de Filosofia, Ciências e Letras de Ribeirão Preto (FFCLRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Espectroscopia de fluorescência Microscopia confocal Miltefosina Endo-1,4-beta-xilanases Proteínas virais de fusão
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: domínios lipídicos | espectroscopia de correlação de fluorescência | Miltefosina | peptideos virais de fusão | Vesículas unilamelares gigantes | Xilanases | Espectroscopia de Fluorescencia

Resumo

Eventos relacionados a processos biológicos envolvem interações entre moléculas e estruturas complexas como a membrana celular, que contem arranjos lipídicos organizados. Mesmo interações em sistema de apenas dois componentes, como enzima e substrato, dependem de dinâmicas conformacionais complexas, em que heterogeneidades são essenciais para a função biológica. Avanços nos estudos dos sistemas foram obtidos com técnicas baseadas no acoplamento da microscopia confocal com a espectroscopia de fluorescência. Com detecção da fluorescência emitida por volume bastante reduzido, é possível examinar eventos relacionados à emissão por poucos fluoróforos e mesmo por uma molécula única (single molecule), e as flutuações podem ser analisadas com técnicas de correlação temporal. Podem ser obtidos perfis de decaimento correspondentes a pequenas regiões das amostras, permitindo ter imagens de tempo de vida da fluorescência. Aplicaremos essas técnicas avançadas, que fornecem informações que não são obtidas pela fluorescência convencional, para estudar a relevância das heterogeneidades em membranas celulares e em enzimas. Esperamos contribuir para descrições e modelos para a membrana biológica, a partir da cooperatividade entre elementos dinâmicos distintos estruturados nas membranas, e para a catálise enzimática, com base na complexa dinâmica conformacional das proteínas. Estudaremos especificamente os efeitos de heterogeneidades em interações entre vesículas unilamelares gigantes e nano-partículas contendo miltefosina, peptídeos virais de fusão e proteinas de membranas. Investigaremos também o papel das heterogeneidades conformacionais proteicas na ação enzimática da xilanase. (AU)

Publicações científicas

(5)

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

DA GAMA BITENCOURT, JOSE JARDES; PAZIN, WALLANCE MOREIRA; ITO, AMANDO SIUITI; BARIONI, MARINA BERARDI; PINTO, CAROLLINE DE PAULA; DOS SANTOS, MARIA APARECIDA; SANTOS GUIMARAES, THALES HENRIQUE; MACHADO DOS SANTOS, MARCIA REGINA; VALDUGA, CLAUDETE JUSTINA. Miltefosine-loaded lipid nanoparticles: Improving miltefosine stability and reducing its hemolytic potential toward erythtocytes and its cytotoxic effect on macrophages. Biophysical Chemistry, v. 217, p. 20-31, OCT 2016. (09/17077-0, 14/26895-7)

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