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Beauveria bassiana lipase a expressed in Komagataella (Pichia) pastoris with potential for biodiesel catalysis

Resumo

Lipases (EC 3.1.1.3) são um grupo de enzimas biotecnologicamente importante, porque são capazes de catalisar tanto reações de hidrólise quanto de síntese, dependendo da quantidade de água no sistema. Uma das aplicações mais interessantes da lipase é na indústria de biocombustível para a produção de biodiesel através da transesterificação entre o óleo e o etanol (ou metanol). Fungos entomopatogênicos, que são potencial fonte de lipases, são pouco explorado em processos biotecnológicos. O presente trabalho relata a expressão heteróloga e caracterização bioquímica de uma nova lipase de Beauveria bassiana, com potencial para produção de biodiesel. A Lipase A de Beauveria bassiana (BbLA) fusionada a uma cauda de seis histidinas foi produzida em Komagataella pastoris em meio de cultivo tamponado (BMM) e induzida com metanol 1% a 30 °C. A BbLA purificada foi ativada por Triton X-100 0,05% e apresentou atividade ótima a pH 6,0 e 50 °C. Cerca de 31,5% do peso molecular da BbLA recombinante corresponde à N-glicosilação. Dicroísmo Circular e modelagem molecular confirmaram uma estrutura composta de ±-hélice e folha-², similar a ±/² hidrolases. BbLA imobilizada foi capaz de promover reações de transesterificação em óleo de peixe, demonstrando potencial para a produção de biodiesel. BbLA foi produzida com sucesso em K. pastoris e mostrou potencial para o uso na produção de biodiesel através de reações de etanólise. (AU)