Perfil de transcrição gênica de células t foliculares auxiliares (Tfh) e mudança isotípica de células b induzida por adjuvantes do tipo 1 ou tipo 2

• Processo: 14/19906-2
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2015
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2018
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Imunologia - Imunologia Celular
• Acordo de Cooperação: Fundação para a Ciência e a Tecnologia (FCT)
• Pesquisador responsável: Momtchilo Russo
• Beneficiário: Momtchilo Russo
• Pesquisador Responsável no exterior: Luis Ricardo Simões da Silva Graça
• Instituição Parceira no exterior: Universidade de Lisboa, Portugal
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Ana Paula Lepique ; Anderson de Sá Nunes ; Juliana Bortolatto ; Luciana Cristina Mirotti ; Luis Ricardo Simões da Silva Graça
• Assunto(s): Biologia computacional Adjuvantes imunológicos Transferência adotiva Células precursoras de linfócitos B Linfócitos T auxiliares-indutores Linfócitos T CD4-positivos Células Th1 Células Th2 Receptores de interleucina-21 Análise de sequência de DNA
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Adjuvants type 1 or type 2 | B cell switching | bioinformatics | RNA seq | T follicular helper cell | Saúde

Resumo

As células T foliculares (Tfh) representam uma população de linfócitos T CD4+ caracterizadas pela expressão do fator de transcrição Bcl6 e que apresentam capacidade singular de interagir com linfócitos B e promover os centros germinativos (CG). A interação destas Tfh com linfócitos B nos folículos de tecidos linfoides secundários leva à troca de isotipo de imunoglobulinas, maturação por afinidade e geração de linfócitos B de memória. Portanto, ao lado da influencia de células Th1, Th2 (e Th17) que guiam a seleção de isotipos, é crítico entender como as células Tfh participam neste processo. A participação de células Tfh em reações alérgicas ainda não está esclarecida. Sabe-se que Bcl6 reprime a expressão de GATA3, um fator de transcrição mestre da células Th2, porém células GC Tfh produzem IL-4 (mas não IL-13) de forma GATA-3 independente. Células Tfh produzem IL-21, citocina que é importante para sua diferenciação e manutenção. Porém, IL-21 reduz a troca de isotipo de IgE e animais deficientes em receptor de IL-21 produzem altos níveis de IgE e administração de IL-21 reduz a produção de IgE anti-OVA. Ainda mais, a geração de IgE pode ocorrer dentro e fora do GC. Em humanos a origem folicular vs extrafolicular da IgE não foi criticamente estudada, embora a produção local de IgE nas mucosas, usualmente associada com GC tem sido documentada. Nossa proposta é determinar o perfil de transcrição de células Tfh induzidas em condições Th2 ou Th1. Nos vamos avaliar duas hipóteses diferentes: Uma que avalia se o auxílio (help) dado pela Tfh em condições Th2 é de responsabilidade de uma célula Tfh não especializada, genérica. Neste caso, a troca isotípica seria influenciada pelo contato com esta célula Tfh genérica e as citocinas produzidas na vizinhança por células Th2 extrafoliculares. O modelo alternativo, postula a existência de subpopulações de células Tfh especializadas em auxilio do tipo Th2 (Tfh2) ou Th1 (Tfh1). Nossa estratégia envolve o uso de transferência adotiva de células CD4+ transgênicas com marcador congênico e imunização com adjuvantes que induzem imunidade do tipo 2 (alum) ou tipo1 (agonistas de TLRs). Isto possibilitará recuperar células T-específicas geradas em condições tipo 1 ou tipo 2 e uma análise subsequente por RNA-Seq permitira identificar assinaturas de genes associado com as células Tfh obtidas nestas condições. Ou seja, nos iremos utilizar células transgênicas, adjuvante tipo 1 e 2, e métodos bioinfomáticos de análise do perfil de transcrição de células Tfh, para poder definir a sua característica em diferentes estados imunológicos. Além de usar o modelo de OVA com imunização em condições tipo 2 ou tipo 1, também utilizaremos animais Bcl6-Cre que não possuem GC para excluir genes das células Tfh. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

ALBERCA-CUSTODIO, RICARDO WESLEY; FAUSTINO, LUCAS D.; GOMES, ELIANE; NUNES, FERNANDA PEIXOTO BARBOSA; DE SIQUEIRA, MIRIAN KRYSTEL; LABRADA, ALEXIS; ALMEIDA, RAFAEL RIBEIRO; CAMARA, NIELS OLSEN SARAIVA; DA FONSECA, DENISE MORAIS; RUSSO, MOMTCHILO. Allergen-Specific Immunotherapy With Liposome Containing CpG-ODN in Murine Model of Asthma Relies on MyD88 Signaling in Dendritic Cells. FRONTIERS IN IMMUNOLOGY, v. 11, APR 23 2020. (15/25364-0, 15/16728-9, 14/19906-2, 13/24694-1, 17/05264-7, 16/16602-8)

ALBERCA CUSTODIO, RICARDO W.; MIROTTI, LUCIANA; GOMES, ELIANE; NUNES, FERNANDA P. B.; VIEIRA, RAQUEL S.; GRACA, LUIS; ALMEIDA, RAFAEL R.; CAMARA, NIELS O. S.; RUSSO, MOMTCHILO. Dendritic Cells Expressing MyD88 Molecule Are Necessary and Sufficient for CpG-Mediated Inhibition of IgE Production In Vivo. CELLS, v. 8, n. 10, OCT 2019. (15/16728-9, 14/19906-2, 13/24694-1, 16/16602-8)