Caracterização das proteínas µ-calpaína, m-calpaína e calpastatina e sua relação c...
- Auxílios pontuais (curta duração)
| Processo: | 15/13021-1 |
| Linha de fomento: | Auxílio à Pesquisa - Regular |
| Vigência: | 01 de novembro de 2015 - 31 de março de 2018 |
| Área do conhecimento: | Ciências Agrárias - Zootecnia - Produção Animal |
| Pesquisador responsável: | Luis Artur Loyola Chardulo |
| Beneficiário: | Luis Artur Loyola Chardulo |
| Instituição-sede: | Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil |
| Pesq. associados: | Henrique Nunes de Oliveira ; Maeli Dal Pai ; Pedro de Magalhães Padilha ; Rogério Abdallah Curi |
| Assunto(s): | Bovinos de corte Maciez da carne |
Resumo
O presente projeto objetiva realizar uma abordagem mais específica acerca da caracterização, expressão e quantificação de importantes proteínas relacionadas ao crescimento do tecido muscular esquelético e a maciez da carne de animais Nelores. Para tanto serão utilizados dados e amostras de 90 animais machos Nelores inteiros com idade aproximada de 27 meses submetidos a manejo de crescimento e acabamento em confinamento por 95 dias. Durante o confinamento foram tomadas medidas de peso e calculados os ganhos de peso vivo nos períodos. Os animais foram abatidos com peso vivo médio de 550 kg, quando então foram coletadas amostras para as análises de expressão gênica e proteica. As carcaças foram então resfriadas por 24 horas quando foram coletadas amostras do músculo Longissimus thoracis para a realização das análises de produção e de qualidade de carne como: área de olho de lombo, espessura de gordura subcutânea, coloração instrumental da carne, força de cisalhamento, perdas por cozimento e determinação do índice de fragmentação miofibrilar e lipídeos totais da carne. As características de desempenho animal, de carcaça e de qualidade da carne serão relacionadas aos estudos analíticos de proteínas. Para tanto serão adotados métodos bioanalíticos específicos como a separação de proteínas por eletroforese bidimensional (2D-PAGE) com ênfase para as proteínas da família das HSP e as do complexo calpaína (calpaína-I, calpaína-II e calpastatina). Serão realizadas ainda a identificação dos íons cálcio nos spots proteicos por fluorescência de raio-X (SR-XRF) e caracterização das proteínas por espectrometria de massas (ESI-MS). Serão feitas as análises de expressão gênica (RT-PCR) das proteínas miofibrilares Cadeia Pesada de Miosina (MyHC) e as relacionadas a proteólise no post-mortem como as calpaína-I, calpaína-II e calpastatina. Ensaios de quantificação de proteínas por Western Blot serão também realizados para as isoformas de MyHC (I, IIa, IIx e IIb) e para as do complexo calpaína. (AU)