Busca de proteínas de superfície nas sequências do genoma da Leptospira interrogans: caracterização funcional e imunológica para o entendimento de mecanismos envolvidos na patogênese de bactéria

• Processo: 14/50981-0
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Temático
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2015
• Data de Término da vigência: 30 de novembro de 2020
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Ana Lucia Tabet Oller do Nascimento
• Beneficiário: Ana Lucia Tabet Oller do Nascimento
• Instituição Sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Bolsa(s) vinculada(s): 18/06201-1 - Identificação dos fatores de virulência da Leptospira interrogans através de análises proteômicas comparativas, BP.DR; 18/08131-0 - Expressão heteróloga do gene LIC13259 na cepa saprófita Leptospira biflexa e aquisição da capacidade de evasão do sistema imune humano, BP.DR; 18/21959-8 - Obtenção de mutantes de Leptospira biflexa e Leptospira interrogans para a avaliação do papel funcional de proteínas do tipo HtrA presentes nas estirpes patogênicas, BP.DD; + mais bolsas vinculadas 18/09652-4 - Avaliação da interação de proteínas de Leptospira interrogans aos componentes do hospedeiro por meio da construção de Leptospira biflexa recombinante, BP.DR; 17/25167-6 - Caracterização estrutural de proteínas de superfície de Leptospira interrogans e termodinâmica da interação com componentes do hospedeiro, BP.PD; 17/26223-7 - Avaliação do papel funcional de proteínas de superfície de Leptospira interrogans como receptores de células endoteliais e epiteliais do hospedeiro, BP.DD; 17/01411-5 - Clonagem, expressão e caracterização de proteínas do tipo HtrA de Leptospira interrogans, BP.MS; 17/01102-2 - Caracterização bioquímica e imunológica de proteínas hipotéticas de superfície de Leptospira interrogans, BP.DD; 16/04295-3 - Interação de duas proteínas de Leptospira interrogans a componentes do plasma e matriz extracelular do hospedeiro, BP.MS; 16/01384-5 - Avaliação do papel funcional de duas proteínas de Leptospira interrogans no processo de adesão do patógeno ao hospedeiro, BP.MS - menos bolsas vinculadas
• Assunto(s): Genômica Diagnóstico clínico Vacinas Leptospira interrogans Desenvolvimento de vacinas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Diagnostico | Genomica Funcional | Leptospira | Vacina

Resumo

A leptospirose é uma zoonose de importância global causada por espiroquetas patogênicas do gênero Leptospira. Não há vacina eficaz até o momento à identificação de proteínas de superfície conservadas entre cepas patogênicas é o foco principal da nossa pesquisa para elucidar os mecanismos de patogenicidade. São estas proteínas que, provavelmente, estão envolvidas na interação das leptospiras com o ambiente externo, podendo participar de atividade de adesão/colonização e ser capaz de induzir uma resposta imune no hospedeiro. Utilizando as seqüências do genoma da L. interrogans e ferramentas de bioinformática, nosso grupo identificou diversas proteínas de membrana ligantes de componentes de matriz extracelular, com possível papel na adesão, proteínas que interagem com componentes do plasma, como por exemplo, plasminogenio-plasmina (PLG/PLA) facilitando no processo de invasão/disseminação e proteínas que se ligam ao fibrinogênio, diminuindo a formação do coágulo de fibrina. Neste sentido, o presente projeto propõe a clonagem, expressão e purificação de 6 novas preditas proteínas de membrana com o objetivo de avaliar: (i) as atividades de imunogenicidade humoral e celular; (ii) capacidade de interação com componentes da matriz extracelular; (iii) capacidade de interação com o sistema fibrinolítico PLG/PLA e possíveis implicações na infecção; (iv) interação aos reguladores do sistema complemento e componentes da via terminal; (v) interação com fatores de coagulação; (vi) avaliação do potencial diagnóstico e de imunoproteção. O grupo pretende contribuir para o conhecimento da patogênese das leptospiras e identificar candidatos para o desenvolvimento de vacina e/ou para o diagnóstico precoce da doença. (AU)

Publicações científicas

(34)

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

TEIXEIRA, ALINE F.; FERNANDES, LUIS G. V.; SOUZA FILHO, ANTONIO; SOUZA, GISELE O.; VASCONCELLOS, SILVIO A.; HEINEMANN, MARCOS B.; NASCIMENTO, ANA L. T. O.. Evaluation of Lsa46 and Lsa77 Leptospiral Proteins for Their Immunoprotective Activities in Hamster Model of Leptospirosis. BIOMED RESEARCH INTERNATIONAL, 2018. (16/11541-0, 14/50981-0, 17/06731-8)

SANTOS, JADSON V.; PEREIRA, PRISCILA R. M.; FERNANDES, LUIS G. V.; SIQUEIRA, GABRIELA HASE; DE SOUZA, GISELE O.; SOUZA FILHO, ANTONIO; VASCONCELLOS, SILVIO A.; HEINEMANN, MARCOS B.; CHAPOLA, ERICA G. B.; NASCIMENTO, ANA L. T. O.. Binding of human plasminogen by the lipoprotein LipL46 of Leptospira interrogans. MOLECULAR AND CELLULAR PROBES, v. 37, p. 12-21, FEB 2018. (12/24164-0, 14/50981-0, 15/02590-5)

NASCIMENTO FILHO, EDSON G.; VIEIRA, MONICA L.; TEIXEIR, ALINE F.; SANTOS, JADEMILSON C.; FERNANDES, LUIS G. V.; PASSALIA, FELIPE J.; DAROZ, BRENDA B.; ROSSINI, AMANDA; KOCHI, LEANDRO T.; CAVENAGUE, MARIA F.; et al. Proteomics as a tool to understand Leptospira physiology and virulence: Recent advances, challenges and clinical implications. JOURNAL OF PROTEOMICS, v. 180, n. SI, p. 80-87, MAY 30 2018. (17/01411-5, 17/06731-8, 14/50981-0, 17/01102-2, 16/11541-0, 16/04295-3, 16/01384-5)

KOCHI, LEANDRO TOSHIO; FERNANDES, LUIS GUILHERME VIRGILIO; NASCIMENTO, ANA LUCIA TABET OLLER. Heterologous Expression of the Pathogen-Specific LIC11711 Gene in the Saprophyte L. biflexa Increases Bacterial Binding to Laminin and Plasminogen. PATHOGENS, v. 9, n. 8, AUG 2020. (18/09652-4, 17/06731-8, 14/50981-0)

TEIXEIRA, ALINE F.; FERNANDES, V, LUIS G.; CAVENAGUE, MARIA F.; TAKAHASHI, MARIA B.; SANTOS, JADEMILSON C.; PASSALIA, FELIPE J.; DAROZ, BRENDA B.; KOCHI, LEANDRO T.; VIEIRA, MONICA L.; NASCIMENTO, ANA L. T. O.. Adjuvanted leptospiral vaccines: Challenges and future development of new leptospirosis vaccines. Vaccine, v. 37, n. 30, p. 3961-3973, JUL 9 2019. (17/01411-5, 17/06731-8, 17/25167-6, 14/50981-0, 17/01102-2, 16/11541-0, 17/26223-7, 17/00236-5, 16/01384-5)

VIEIRA, MONICA L.; HERWALD, HEIKO; NASCIMENTO, ANA LUCIA T. O.. The interplay between host haemostatic systems and Leptospira spp. infections. CRITICAL REVIEWS IN MICROBIOLOGY, v. 46, n. 2, MAR 2020. (17/00236-5, 14/50981-0)

GRABARZ, FELIPE; LOPES, ALEXANDRE PAULO YAGUE; BARBOSA, FLAVIA FERREIRA; BARAZZONE, GIOVANA CAPPIO; SANTOS, JADEMILSON CELESTINO; BOTOSSO, VIVIANE FONGARO; JORGE, SORAIA ATTIE CALIL; NASCIMENTO, ANA LUCIA TABET OLLER; ASTRAY, RENATO MANCINI; GONCALVES, VIVIANE MAIMONI. Strategies for the Production of Soluble Interferon-Alpha Consensus and Potential Application in Arboviruses and SARS-CoV-2. LIFE-BASEL, v. 11, n. 6, JUN 2021. (14/50981-0, 16/50413-8)

PEREIRA, PRISCILA R. M.; FERNANDES, LUIS G. V.; DE SOUZA, GISELE O.; VASCONCELLOS, SILVIO A.; HEINEMANN, MARCOS B.; ROMERO, ELIETE C.; NASCIMENTO, ANA L. T. O.. Multifunctional and Redundant Roles of Leptospira interrogans Proteins in Bacterial-Adhesion and fibrin clotting inhibition. INTERNATIONAL JOURNAL OF MEDICAL MICROBIOLOGY, v. 307, n. 6, p. 297-310, SEP 2017. (15/02590-5, 14/50981-0, 12/23913-9, 12/24164-0)

SILVA, LUCAS P.; FERNANDES, LUIS G. V.; VIEIRA, MONICA L.; DE SOUZA, GISELE O.; HEINEMANN, MARCOS B.; VASCONCELLOS, SILVIO A.; ROMERO, ELIETE C.; NASCIMENTO, ANA L. T. O.. Evaluation of two novel leptospiral proteins for their interaction with human host components. PATHOGENS AND DISEASE, v. 74, n. 5, JUL 2016. (14/50981-0, 14/18337-4, 12/23913-9, 12/24164-0)

COSATE, MARIA RAQUEL; SIQUEIRA, GABRIELA HASE; DE SOUZA, GISELE OLIVEIRA; VASCONCELLOS, SILVIO ARRUDA; NASCIMENTO, ANA LUCIA T. O.. Mammalian cell entry (Mce) protein of Leptospira interrogans binds extracellular matrix components, plasminogen and 2 integrin. MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY, v. 60, n. 9, p. 586-598, SEP 2016. (12/51165-7, 14/50981-0, 12/23913-9, 14/03792-8)

VIEIRA, MONICA L.; TEIXEIRA, ALINE F.; PIDDE, GISELLE; CHING, ANA T. C.; TAMBOURGI, DENISE V.; NASCIMENTO, ANA LUCIA T. O.; HERWALD, HEIKO. Leptospira interrogans outer membrane protein LipL21 is a potent inhibitor of neutrophil myeloperoxidase. VIRULENCE, v. 9, n. 1, p. 414-425, 2018. (14/50981-0, 14/18337-4)

LOPES, ALEXANDRE P. Y.; AZEVEDO, BRUNA O. P.; EMIDIO, REBECA C.; DAMIANO, DEBORAH K.; NASCIMENTO, ANA L. T. O.; BARAZZONE, GIOVANA C.. In Silico Analysis of Genetic VapC Profiles from the Toxin-Antitoxin Type II VapBC Modules among Pathogenic, Intermediate, and Non-Pathogenic Leptospira. MICROORGANISMS, v. 7, n. 2, FEB 2019. (14/50981-0)

FERNANDES, L. G. V.; HORNSBY, R. L.; NASCIMENTO, A. L. T. O.; NALLY, J. E.. Genetic manipulation of pathogenic Leptospira: CRISPR interference (CRISPRi)-mediated gene silencing and rapid mutant recovery at 37 degrees C. SCIENTIFIC REPORTS, v. 11, n. 1, JAN 19 2021. (14/50981-0, 17/06731-8, 19/20302-8)

PASSALIA, FELIPE JOSE; CARVALHO, ENEAS; HEINEMANN, MARCOS BRYAN; VIEIRA, MONICA LARUCCI; NASCIMENTO, ANA LUCIA T. O.. The Leptospira interrogans LIC10774 is a multifunctional surface protein that binds calcium and interacts with host components. MICROBIOLOGICAL RESEARCH, v. 235, MAY 2020. (17/00236-5, 14/50981-0, 17/01102-2, 18/07054-2)

SANTOS, JADEMILSON C.; VIEIRA, MONICA L.; ABENDROTH, JAN; LIN, TAO; STAKER, BART L.; MYLER, PETER J.; NASCIMENTO, ANA LUCIA T. O.. Structural analysis of CACHE domain of the McpA chemoreceptor from Leptospira interrogans. Biochemical and Biophysical Research Communications, v. 533, n. 4, p. 1323-1329, DEC 17 2020. (17/25167-6, 14/50981-0)

DAROZ, BRENDA BEVILAQUA; VIRGILIO FERNANDES, LUIS GUILHERME; TEIXEIRA, ALINE FLORENCIO; TABET OLLER NASCIMENTO, ANA LUCIA. In Silico Structural and Functional Characterization of HtrA Proteins of Leptospira spp.: Possible Implications in Pathogenesis. TROPICAL MEDICINE AND INFECTIOUS DISEASE, v. 5, n. 4, DEC 2020. (18/21959-8, 17/06731-8, 16/11541-0, 14/50981-0)

FERNANDES, L. G., V; HORNSBY, R. L.; NASCIMENTO, A. L. T. O.; NALLY, J. E.. Application of CRISPR Interference (CRISPRi) for Gene Silencing in Pathogenic Species of Leptospira. JOVE-JOURNAL OF VISUALIZED EXPERIMENTS, v. N/A, n. 174, p. 14-pg., 2021-08-01. (17/06731-8, 14/50981-0, 19/20302-8)

TAKAHASHI, MARIA BEATRIZ; TEIXEIRA, ALINE FLORENCIO; NASCIMENTO, ANA LUCIA TABET OLLER. Overcoming problems to produce the recombinant protein LipL21 of Leptospira interrogans. BIOTECHNIQUES, v. N/A, p. 6-pg., 2023-04-17. (14/50981-0, 19/17488-2, 17/26223-7, 16/11541-0)

TEIXEIRA, ALINE F.; FERNANDES, LUIS G. V.; SOUZA FILHO, ANTONIO; SOUZA, GISELE O.; VASCONCELLOS, SILVIO A.; HEINEMANN, MARCOS B.; NASCIMENTO, ANA L. T. O.. Evaluation of Lsa46 and Lsa77 Leptospiral Proteins for Their Immunoprotective Activities in Hamster Model of Leptospirosis. BIOMED RESEARCH INTERNATIONAL, v. 2018, p. 13-pg., 2018-01-01. (14/50981-0, 16/11541-0, 17/06731-8)

NASCIMENTO FILHO, EDSON G.; VIEIRA, MONICA L.; TEIXEIR, ALINE F.; SANTOS, JADEMILSON C.; FERNANDES, LUIS G. V.; PASSALIA, FELIPE J.; DAROZ, BRENDA B.; ROSSINI, AMANDA; KOCHI, LEANDRO T.; CAVENAGUE, MARIA F.; et al. Proteomics as a tool to understand Leptospira physiology and virulence: Recent advances, challenges and clinical implications. JOURNAL OF PROTEOMICS, v. 180, p. 8-pg., 2018-05-30. (14/50981-0, 17/01411-5, 17/01102-2, 16/01384-5, 16/04295-3, 16/11541-0, 17/06731-8)

PASSALIA, FELIPE JOSE; HEINEMANN, MARCOS BRYAN; VIEIRA, MONICA LARUCCI; NASCIMENTO, ANA LUCIA T. O.. A Novel Leptospira interrogans Protein LIC13086 Inhibits Fibrin Clot Formation and Interacts With Host Components. FRONTIERS IN CELLULAR AND INFECTION MICROBIOLOGY, v. 11, JUL 1 2021. (17/01102-2, 18/07054-2, 17/00236-5, 14/50981-0, 19/17488-2)

TEIXEIRA, ALINE F.; CAVENAGUE, MARIA F.; KOCHI, LEANDRO T.; FERNANDES, LUIS G.; SOUZA, GISELE O.; DE SOUZA FILHO, ANTONIO FRANCISCO; VASCONCELLOS, SILVIO A.; HEINEMANN, MARCOS BRYAN; NASCIMENTO, ANA L. T. O.. Immunoprotective Activity Induced by Leptospiral Outer Membrane Proteins in Hamster Model of Acute Leptospirosis. FRONTIERS IN IMMUNOLOGY, v. 11, OCT 30 2020. (14/50981-0, 17/06731-8, 18/09652-4, 18/08131-0, 16/11541-0)

VIEIRA, MONICA L.; PERSSON, SANDRA; LOPES-FERREIRA, MONICA; ROMERO, ELIETE C.; KIRCHGATTER, KARIN; NASCIMENTO, ANA LUCIA T. O.; HERWALD, HEIKO. Heparin-Binding Protein Release Is Strongly Induced by Leptospira Species and Is a Candidate for an Early Diagnostic Marker of Human Leptospirosis. Journal of Infectious Diseases, v. 219, n. 6, p. 996-1006, MAR 15 2019. (14/18337-4, 14/50981-0, 18/07054-2)

SIQUEIRA, GABRIELA H.; DE SOUZA, GISELE O.; HEINEMANN, MARCOS B.; VASCONCELLOS, SILVIO A.; NASCIMENTO, ANA L. T. O.. The role of Lsa23 to mediate the interaction of Leptospira interrogans with the terminal complement components pathway. Microbial Pathogenesis, v. 112, p. 182-189, NOV 2017. (14/50981-0, 14/03792-8)

CAVENAGUE, MARIA F.; TEIXEIRA, ALINE F.; FILHO, ANTONIO S.; SOUZA, GISELE O.; VASCONCELLOS, SILVIO A.; HEINEMANN, MARCOS B.; NASCIMENTO, ANA L. T. O.. Characterization of a novel protein of Leptospira interrogans exhibiting plasminogen, vitronectin and complement binding properties. INTERNATIONAL JOURNAL OF MEDICAL MICROBIOLOGY, v. 309, n. 2, p. 116-129, MAR 2019. (16/11541-0, 14/50981-0, 16/04295-3)

FERNANDES, LUIS G. V.; TEIXEIRA, ALINE F.; FILHO, ANTONIO F. S.; SOUZA, GISELE O.; VASCONCELLOS, SILVIO A.; HEINEMANN, MARCOS B.; ROMERO, ELIETE C.; NASCIMENTO, ANA L. T. O.. Immune response and protective profile elicited by a multi-epitope chimeric protein derived from Leptospira interrogans. INTERNATIONAL JOURNAL OF INFECTIOUS DISEASES, v. 57, p. 61-69, APR 2017. (12/01797-7, 12/23913-9, 14/50981-0)

KOCHI, LEANDRO T.; FERNANDES, V, LUIS G.; SOUZA, GISELE O.; VASCONCELLOS, SILVIO A.; HEINEMANN, MARCOS B.; ROMERO, ELIETE C.; KIRCHGATTER, KARIN; NASCIMENTO, ANA L. T. O.. The interaction of two novel putative proteins of Leptospira interrogans with E-cadherin, plasminogen and complement components with potential role in bacterial infection. VIRULENCE, v. 10, n. 1, p. 734-753, JAN 1 2019. (16/01384-5, 17/06731-8, 14/50981-0)

FIGUEREDO, JUPCIANA M.; SIQUEIRA, GABRIELA H.; DE SOUZA, GISELE O.; HEINEMANN, MARCOS B.; VASCONCELLOS, SILVIO A.; CHAPOLA, ERICA G. B.; NASCIMENTO, ANA L. T. O.. Characterization of two new putative adhesins of Leptospira interrogans. MICROBIOLOGY-SGM, v. 163, n. 1, p. 37-51, JAN 2017. (14/50981-0, 12/23913-9)

VIEIRA, MONICA L.; DE ANDRADE, SONIA A.; MORAIS, ZENAIDE M.; VASCONCELLOS, SILVIO A.; DAGLI, MARIA LUCIA Z.; NASCIMENTO, ANA LUCIA T. O.. Leptospira Infection Interferes with the Prothrombinase Complex Assembly during Experimental Leptospirosis. FRONTIERS IN MICROBIOLOGY, v. 8, MAR 28 2017. (14/50981-0, 12/23913-9, 12/50523-7)

VIEIRA, MONICA LARUCCI; NASCIMENTO, ANA LUCIA T. O.. VirulentLeptospira interrogansInduce Cytotoxic Effects in Human Plateletsin vitroThrough Direct Interactions. FRONTIERS IN MICROBIOLOGY, v. 11, SEP 24 2020. (14/50981-0, 18/07054-2)

FERNANDES, LUIS G. V.; FILHO, ANTONIO F. S.; SOUZA, GISELE O.; VASCONCELLOS, SILVIO A.; ROMERO, ELIETE C.; NASCIMENTO, ANA L. T. O.. Decrease in antithrombin III and prothrombin serum levels contribute to coagulation disorders during leptospirosis. MICROBIOLOGY-SGM, v. 162, n. 8, p. 1407-1421, AUG 2016. (14/50981-0, 12/23913-9, 12/24164-0)

FERNANDES, L. G. V.; GUAMAN, L. P.; VASCONCELLOS, S. A.; HEINEMANN, MARCOS B.; PICARDEAU, M.; NASCIMENTO, A. L. T. O.. Gene silencing based on RNA-guided catalytically inactive Cas9 (dCas9): a new tool for genetic engineering in Leptospira. SCIENTIFIC REPORTS, v. 9, FEB 12 2019. (17/06731-8, 14/50981-0)

SANTOS, JADSON V.; PEREIRA, PRISCILA R. M.; FERNANDES, LUIS G. V.; SIQUEIRA, GABRIELA HASE; DE SOUZA, GISELE O.; SOUZA FILHO, ANTONIO; VASCONCELLOS, SILVIO A.; HEINEMANN, MARCOS B.; CHAPOLA, ERICA G. B.; NASCIMENTO, ANA L. T. O.. Binding of human plasminogen by the lipoprotein LipL46 of Leptospira interrogans. MOLECULAR AND CELLULAR PROBES, v. 37, p. 10-pg., 2018-02-01. (15/02590-5, 14/50981-0, 12/24164-0)

SANTOS, JADEMILSON C.; HANDA, SUMIT; FERNANDES, LUIS G. V.; BLEICHER, LUCAS; GANDIN, CESAR A.; DE OLIVEIRA-NETO, MARIO; GHOSH, PARTHO; NASCIMENTO, ANA LUCIA T. O.. Structural and biochemical characterization of Leptospira interrogans Lsa45 reveals a penicillin-binding protein with esterase activity. Process Biochemistry, v. 125, p. 13-pg., 2022-12-22. (14/50981-0, 17/25167-6, 18/20321-0, 19/17488-2, 17/06731-8)