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Terapia fotodinâmica antimicrobiana e seu efeito em biofilme responsável pela cárie dental

Resumo

O objetivo deste estudo será avaliar o efeito da TFDA utilizando-se diferentes fotossensibilizadores em biofilme multi espécie (Streptococcus mutans, Streptococcus sobrinus e Actinomyces naeslundi) induzidos na superfície de discos de hidroxiapatita por 7 dias. Serão utilizados curcumina, curcuminóides, clorina-e6 e ftalocianina de zinco incorporados ou não em sistemas nanoestruturados precursores de cristais líquidos em concentrações previamente determinadas pelas CIM e CBM irradiados por LED (450 ou 660nm) com densidade de energia da ordem de 15J/cm2. Além disso, avaliaremos a citotoxicidade no escuro dos fotossensibilizadores, bem como os mecanismos envolvidos na reação fotodinâmica por absorção óptica, fluorescência e estimativa da geração de oxigênio singleto e radicais OH-. Para a atividade antibacteriana utilizaremos a técnica para contagem das unidades formadoras de colônias (UFC/mL), porcentagem de sobrevivência e metabolismo do biofilme pelo teste do XTT, bioquímica dos biofilmes, viabilidade celular, arquitetura (estrutura 3D, biovolume e espessura) e síntese de polissacarídeos por meio de microscopia confocal a Laser. Diferentes condições serão testadas: a) irradiação LED (L) + fotossensibilizador (F) (FS+L+); b) irradiação LED apenas (FS-L+); c) fotossensibilizador apenas (FS+L-); d) sem irradiação LED e sem fotossensibilizador (FS-L-) para todos os fotossensibilizadores e e) clorexidina (C). Citotoxicidade em cultura de células odontoblastóides será investigada para o fotossensibilizador que apresentar os melhores resultados em UFC/mL e metabolismo do biofilme pelo teste do XTT. Após obtenção dos resultados nos experimentos anteriores, o fotossensibilizador que apresentar os melhores resultados será aplicado em cárie artificial, induzida em fragmentos de esmalte e dentina bovina por modelo biológico, associado à aplicação de flúor ou vidro bioativo em auxiliar na remineralização. Os resultados serão submetidos à análise estatística descritiva, análise de Variância (ANOVA) e teste de Tukey ao nível de 5% de significância ou à análise estatística não paramétrica. (AU)