Estudos sobre a melatonina na função e qualidade de complexos cumulus-oócitos bovinos

• Processo: 15/20379-0
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2016
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2018
• Área do conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Cláudia Lima Verde Leal
• Beneficiário: Cláudia Lima Verde Leal
• Instituição Sede: Faculdade de Zootecnia e Engenharia de Alimentos (FZEA). Universidade de São Paulo (USP). Pirassununga , SP, Brasil
• Assunto(s): Maturação in vitro Receptores Melatonina Estresse oxidativo Inativação gênica
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Estresse oxidativo | maturação in vitro | melatonina | Mt1 | receptor | silenciamento genico | Biotecnologias da reprodução

Resumo

A produção in vitro (PIV) de embriões em bovinos é uma importante ferramenta na produção animal e para o melhoramento genético dos rebanhos, o que na economia brasileira tem importância particular dado o peso do rebanho bovino para o mercado interno e externo. Além disso, o Brasil é o maior produtor mundial de embriões bovinos de PIV. Apesar disso, a PIV ainda apresenta desafios, visto que a produção ainda está aquém do desejável e os embriões ainda têm menor qualidade e capacidade de suportar a criopreservação. Assim ainda há necessidade de melhorias ao processo e a melhor compreensão dos fatores envolvidos na eficiência da técnica é essencial para o seu aprimoramento. Dos diversos fatores que podem interferir nos resultados da PIV, a etapa de maturação in vitro (MIV) durante a PIV tem papel relevante. O processo de maturação oocitária tem impacto na qualidade e competência do oócito e no desenvolvimento embrionário subsequente. A melatonina é um hormônio com diversas funções, que além de ter atividade antioxidante e antiapoptótica, também é capaz de influenciar diferentes vias de sinalização celular. Recentemente (processo 2010/18023-9) observamos que a melatonina está presente no fluido folicular bovino (Coelho et al, 2013) e que durante a MIV ela estimula a retomada da maturação nuclear e a maturação citoplasmática (produção de embriões PIV) em níveis similares ao do FSH. Além disso, influenciou a expressão de genes de enzimas antioxidantes e reduziu os índices de apoptose em células do cumulus (CC), mostrando ter efeitos não só sobre o oócito (OO) como sobre suas células do cumulus (Valerino da Cunha, 2014). Como essas células são essenciais para o desenvolvimento oocitário, propomos estudar a influência do receptor de melatonina (MT1) nas funções das mesmas. A investigação do papel do MT1 será realizada por silenciamento gênico usando RNA de interferência (siRNA). Nesse estudo serão avaliados: 1) o perfil de expressão temporal do MT1 nas CC ao longo da MIV para determinar o melhor momento para o silenciamento; 2) as condições de lipofecção (tempo de exposição e concentração do lipofector) das CC em complexos cumulus-oócitos (CCOs) durante a MIV; 3) o efeito da perda de função do MT1 nas CC sobre expansão, expressão dos genes antioxidantes (SOD1 e SOD2) e índice de apoptose nas CC e 4) as consequências sobre os oócitos, em relação às taxas de maturação nuclear, níveis de espécies reativas de oxigênio (ROS) e competência para o desenvolvimento após fecundação in vitro (FIV). (AU)

Publicações científicas

(4)

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

CAVALLARI, FERNANDA DE CASTRO; VERDE LEAL, CLAUDIA LIMA; ZVI, ROTH; HANSEN, PETER J.. Effects of melatonin on production of reactive oxygen species and developmental competence of bovine oocytes exposed to heat shock and oxidative stress during in vitro maturation. ZYGOTE, v. 27, n. 3, p. 180-186, JUN 2019. (15/20379-0, 17/04376-6)

BOTIGELLI, RAMON CESAR; RAZZA, EDUARDO MONTANARI; PIOLTINE, ELISA MARIANO; FONTES, PATRICIA KUBO; LANCELLOTTI SCHWARZ, KATIA REGINA; VERDE LEAL, CLAUDIA LIMA; GOUVEIA NOGUEIRA, MARCELO FABIO. Supplementing in vitro embryo production media by NPPC and sildenafil affect the cytoplasmic lipid content and gene expression of bovine cumulus-oocyte complexes and embryos. REPRODUCTIVE BIOLOGY, v. 18, n. 1, p. 66-75, MAR 2018. (12/23409-9, 15/20379-0, 14/25072-7, 13/05083-1, 12/50533-2, 13/07730-4, 12/00170-0)

LETÍCIA SCHEFER; KÁTIA REGINA LANCELLOTI SCHWARZ; DANIELA MARTINS PASCHOAL; FERNANDA CAVALLARI DE CASTRO; HUGO FERNANDES; RAMON CÉSAR BOTIGELLI; CLÁUDIA LIMA VERDE LEAL. Effects of different stimulators of cGMP synthesis on lipid content in bovine oocytes matured in vitro. Animal Reproduction, v. 18, n. 4, 2021-12-10. (15/19888-7, 15/20379-0)

SCHEFER, LETICIA; LANCELLOTI SCHWARZ, KATIA REGINA; PASCHOAL, DANIELA MARTINS; DE CASTRO, FERNANDA CAVALLARI; FERNANDES, HUGO; BOTIGELLI, RAMON CESAR; VERDE LEAL, CLAUDIA LIMA. ffects of different stimulators of cGMP synthesis on lipid content in bovine oocytes matured in vitr. ANIMAL REPRODUCTION, v. 18, n. 4, 2021. (15/20379-0, 15/19888-7)