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Caracterização bioquímica de caspases-símile envolvidas no ciclo celular de eucariotos simples

Processo: 15/11190-0
Linha de fomento:Auxílio à Pesquisa - Regular
Vigência: 01 de agosto de 2016 - 31 de julho de 2018
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Enzimologia
Pesquisador responsável:Mauricio Ferreira Marcondes Machado
Beneficiário:Mauricio Ferreira Marcondes Machado
Instituição-sede: Pró-Reitoria Acadêmica. Universidade de Mogi das Cruzes (UMC). Campus da Sede Mogi das Cruzes. Mogi das Cruzes , SP, Brasil
Pesq. associados:Ivarne Luis dos Santos Tersariol ; Marcelo Andrade de Lima
Assunto(s):Cinética enzimática  Ciclo celular 

Resumo

O ciclo de vida é determinado basicamente pelos processos de divisão, diferenciação e morte. Nos últimos anos, estudos mostraram o envolvimento de uma família de proteases envolvidas na morte celular programada em mamíferos, em organismos eucarióticos simples como fungos e protozoários (metacaspases), em metazoários, bem como no ameboide Dictyostelium sp (paracaspases), entretanto, poucos são os estudos sobre a funcionalidade bioquímicos dessas proteases. No presente projeto pretendemos realizar o estudo bioquímicos para a determinação dos parâmetros cinéticos (KM, kcat e kcat/KM) da metacaspases de Trypanossoma brucei (TbMCA2) eSaccharomyces cerevisiae (YCA1) e da paracaspase de Dictyostelium discoideum, com isso estudar a especificidade, avaliarmos qual o efeito de sais, pH e temperatura na atividade proteolítica destas proteases. Recentemente foi descrito a importância do cálcio no funcionamento destas proteases, pretendemos realizar ensaios cinéticos com as enzimas selvagens e contendo mutações sítio dirigidas, variando a concentração destes íons e averiguarmos qual a importância do mesmo na relação estrutura-atividade destas proteases, avaliando o efeito do cálcio nos parâmetros físico-químicos das metacaspases e paracaspase. Pretendemos implementar em nosso laboratório uma cultura de Dictyostelium discoideum para estudos posteriores da ação das caspases-símile (metacaspases e paracaspases) sobre o ciclo de vida e comunicação celular deste modelo celular. (AU)

Publicações científicas
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
ANTUNES, ALYNE ALEXANDRINO; PASSOS JESUS, LARISSA DE OLIVEIRA; MANFREDI, MARCELLA ARAUJO; DE SOUZA, ALINE APARECIDA; MARCONDES MACHADO, MAURICIO FERREIRA; MORAES E SILVA, PAMELA; ICIMOTO, MARCELO YUDI; JULIANO, MARIA APARECIDA; JULIANO, LUIZ; DE SOUZA JUDICE, WAGNER ALVES. Thermodynamic analysis of Kex2 activity: The acylation and deacylation steps are potassium- and substrate-dependent. Biophysical Chemistry, v. 235, p. 29-39, APR 2018. Citações Web of Science: 1.
GILIO, JOYCE M.; MARCONDES, MARCELO F.; FERRARI, DEBORA; JULIANO, MARIA A.; JULIANO, LUIZ; OLIVEIRA, VITOR; MACHADO, MAURICIO F. M. Processing of metacaspase 2 from Trypanosoma brucei (TbMCA2) broadens its substrate specificity. BIOCHIMICA ET BIOPHYSICA ACTA-PROTEINS AND PROTEOMICS, v. 1865, n. 4, p. 388-394, APR 2017. Citações Web of Science: 6.

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