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Efeito das redes extracelulares dos neutrófilos (NETs) no bloqueio da replicação do vírus sincicial respiratório humano (HRSV)

Processo: 16/03867-3
Linha de fomento:Auxílio à Pesquisa - Regular
Vigência: 01 de outubro de 2016 - 30 de setembro de 2018
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Imunologia - Imunologia Celular
Pesquisador responsável:Karina Alves de Toledo
Beneficiário:Karina Alves de Toledo
Instituição-sede: Faculdade de Ciências e Letras (FCL-ASSIS). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Assis. Assis , SP, Brasil
Pesq. associados:Fátima Pereira de Souza
Bolsa(s) vinculada(s):16/21324-7 - Efeito das redes extracelulares dos neutrófilos (NETs) no bloqueio da replicação do vírus sincicial respiratório humano (HRSV), BP.TT
Assunto(s):Doenças pulmonares intersticiais  Vírus sinciciais respiratórios  Interações vírus-célula  Antivirais  Imunidade inata  Inflamação  Neutrófilos 

Resumo

No mundo, estima-se 12 milhões de casos graves de infecção do trato respiratório inferior, incluindo infecções pelo vírus sincicial respiratório (hRSV) que contribui no desenvolvimento de bronquiolite, pneumonia e infecções pulmonares obstrutivas. Os neutrófilos são os fagócitos predominantes nestas infecções, contribuindo na eliminação de patógenos através de mecanismos microbicidas clássicos. Neutrófilos produzem armadilhas extracelulares (NETs), constituídas por DNA genômico associado as proteínas nucleares/granulares que capturam e eliminam diferentes microrganismos. Estas estruturas são geradas a partir de diferentes estímulos, incluindo o hRSV. A presença das NETs foi detectada em tecido pulmonar de indivíduos infectados por hRSV, mas a sua importância em infecções por esse vírus ainda não foi elucidada. O objetivo deste trabalho será investigar se as NETs possuem efeito sobre a infecção/replicação do vírus hRSV. Para tanto, serão utilizadas abordagens in vitro e in sílico. NETs geradas sob o estímulo de PMA serão testadas em diferentes protocolos antivirais (pré-tratamento, virucida, pós-tratamento) tendo como alvo células Hep-2 infectadas ou não pelo vírus hRSV. Grupos adicionais, receberão tratamentos com NETs + Palivizumab (anticorpo monoclonal anti-RSV). A proteção celular (ou inibição da infecção/replicação) será acompanhada por ensaios de adição do sal de MTT. Resultados promissores (proteção celular de 50% ou mais) serão analisados usando ensaios de redução de placa. A determinação dos valores de CC50 e CE50 possibilitarão o cálculo do Índice de Seletividade, o qual indicará quão promissora é a presença das NETs durante uma infecção por hRSV. Por fim, uma possível interação entre as NETs e a proteína F do hRSV será avaliada por estudos de Docking Molecular. Os resultados obtidos com o desenvolvimento deste projeto auxiliarão no entendimento da participação benéfica ou patogênica dos neutrófilos durante a resposta imunológica na infecção por hRSV. (AU)

Publicações científicas
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
SAMPAIO SOUZA, PRISCILA SILVA; BARBOSA, LIA VEZENFARD; ALVES DINIZ, LARISSA FIGUEIREDO; DA SILVA, GABRIEL SOARES; PEREIRA LOPES, BRUNO RAFAEL; RIBEIRO SOUZA, PEDRO MIYADAIRA; DE ARAUJO, GABRIELA CAMPOS; PESSOA, DIOGO; DE OLIVEIRA, JULIANA; SOUZA, FATIMA PEREIRA; TOLEDO, KARINA ALVES. Neutrophil extracellular traps possess anti-human respiratory syncytial virus activity: Possible interaction with the viral F protein. VIRUS RESEARCH, v. 251, p. 68-77, JUN 2 2018. Citações Web of Science: 2.

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