O efeito da programação metabólica por restrição calórica em áreas do sistema nervoso central de ratos wistar relacionadas com o comportamento alimentar: núcleo do trato solitário e área hipotalâmica lateral

• Processo: 16/13136-6
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Morfologia - Anatomia
• Pesquisador responsável: José de Anchieta de Castro e Horta Júnior
• Beneficiário: José de Anchieta de Castro e Horta Júnior
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IBB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Assunto(s): Hormônio concentrador de melanina Hibridização in situ Microscopia eletrônica de transmissão
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Hibridização in situ | hormônio concentrador de melanina | Microscopia eletrônica de transmissão | programação metabólica por restrição calórica | transcrito regulado pela cocaína e anfetamina | transportador vesicular de glutamato - tipo 2 | Neurociências - Neuromorfologia

Resumo

O estado nutricional materno durante períodos críticos de desenvolvimento da prole (fetal e neonatal) é considerado um importante indutor de Programação, já que a deficiência de nutrientes durante a prenhez e a lactação, provoca alterações significativas no peso corpóreo, balanço energético, ingestão alimentar e expressão de neuropeptídeos. No sistema nervoso central, estas alterações poderiam ocorrer especialmente em áreas que se desenvolvem no período embrionário e neonatal e são importantes para o controle do comportamento alimentar, como o núcleo do trato solitário (NTS), que desempenha papel fundamental na integração de informação visceral para o controle da saciedade e a área hipotalâmica lateral (LHA), envolvida na regulação do balanço energético e controle da ingestão de alimento. O NTS é um complexo constituído por 12 subnúcleos citoarquitetônicos, onde a sinalização relacionada à saciedade é mediada em grande parte pelos aferentes primários glutamatérgicos provenientes do estômago e duodeno, imunorreativos ao transportador vesicular de glutamato - tipo 2 (VGLUT2) e modulada por diversos neuropeptídeos. O hormônio concentrador de melanina (MCH) e o transcrito regulado pela cocaína e anfetamina (CART) são neuropeptídeos amplamente expressos no sistema nervoso central e, especialmente na LHA mas também no NTS, onde o MCH desempenha papel orexígeno e o CART anorexígeno. Assim, nosso objetivo é analisar a expressão do MCH e do CART e a ultraestrutura dos neurônios imunorreativos a esses neuropeptídeos (MCH-ir e CART-ir) na área hipotalâmica lateral, comparar a organização citoarquitetônica e mapear a imunorreatividade ao MCH, ao CART e ao VGLUT2 no NTS de ratos cujas mães foram submetidas à restrição calórica durante a prenhez e lactação. Para sua execução, serão realizados acasalamentos de ratos adultos da linhagem Wistar para obtenção das proles, as quais serão objeto de estudo. Após a detecção da prenhez, as fêmeas serão separadas para a formação de dois grupos experimentais: grupo controle (GC), dieta normal ad libitum, e grupo restrição calórica (GR), dieta de 50% de restrição em relação ao grupo controle durante os períodos de prenhez e lactação. Detectado o nascimento, serão avaliados o número de animais de cada prole e peso de cada animal macho no dia pós-natal 1. Os filhotes machos, provenientes dos grupos restrição (GR) e controle (GC), serão divididos em cinco subgrupos etários (n=8) de 21, 28, 50, 90 e 540 dias. Serão avaliados em cada animal: peso, comprimento corpóreo, ingestão alimentar após o desmame, níveis sanguíneos de glicose, insulina e leptina. Todos os animais serão submetidos à perfusão transcardíaca e após a fixação, o encéfalo e os tecidos adiposos visceral e retroperitoneal serão pesados. Os encéfalos serão processados para análise da expressão do MCH e do CART na LHA, segundo protocolos de imuno-histoquímica, hibridização in situ (n=5) e microscopia eletrônica de transmissão (n=3). O mapeamento e a estimativa do número de neurônios MCH-ir e CART-ir na área hipotalâmica lateral serão realizados, respectivamente, através de reconstrução 3D e estudo estereológico. A análise comparativa da quantidade de RNAm para o MCH e o CART, nos diferentes grupos experimentais, será realizada por mensuração da densidade óptica integrada da área marcada pela hibridização in situ. A ultraestrutura dos neurônios MCH-ir e CART-ir será analisada por microscopia eletrônica de transmissão. No NTS, será mapeada a distribuição das fibras MCH-ir e VGLUT2-ir e fibras e somas CART-ir, seguida de densitometria óptica e experimentos de colocalização por imunofluorescência, entre as fibras nervosas VGLUT2-ir e MCH-ir ou CART-ir. Será realizado estudo citoarquitetônico do NTS utilizando como marcadores a imunorreatividade à calbindina D-28K e óxido nítrico sintase seguida de reconstrução 3D. Os dados quantitativos obtidos em cada idade serão comparados e analisados estatisticamente quanto a sua significância (p<0,05). (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

PEREIRA, LAIS DA SILVA; GOBBO, DENISE RIBEIRO; FERREIRA, JOZELIA GOMES PACHECO; HORTA-JUNIOR, JOSE DE ANCHIETA DE CASTRO E; SA, SUSANA ISABEL; BITTENCOURT, JACKSON CIONI. Effects of ovariectomy on inputs from the medial preoptic area to the ventromedial nucleus of the hypothalamus of young adult rats. Journal of Anatomy, v. 238, n. 2, SEP 2020. (16/02224-1, 10/52068-0, 16/13136-6)

CABRAL RODRIGUES, LAISA TAIS; SALATA, BRUNO; HORTA-JUNIOR, JOSE DE ANCHIETA C.; GARGAGLIONI, LUCIANE H.; DIAS, MIRELA BARROS. Adenosine in the lateral hypothalamus/perifornical area does not participate on the CO2 chemoreflex. Respiratory Physiology & Neurobiology, v. 276, MAY 2020. (16/13136-6, 17/02181-3, 13/04216-8)

EMILIO-SILVA, MAYCON T.; RODRIGUES, VINICIUS P.; BUENO, GABRIELA; OHARA, RIE; MARTINS, MARINA G.; HORTA-JUNIOR, JOSE A. C.; BRANCO, LUIZ G. S.; ROCHA, LUCIA R. M.; HIRUMA-LIMA, CLELIA A.. Hypothermic Effect of Acute Citral Treatment during LPS-induced Systemic Inflammation in Obese Mice: Reduction of Serum TNF-alpha and Leptin Levels. BIOMOLECULES, v. 10, n. 10, OCT 2020. (18/10935-0, 18/09873-0, 16/13136-6)