Papel dos microRNAs na resposta imune mediada por TLRs na infecção por Leishmania amazonensis.

• Processo: 16/19815-2
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2016
• Data de Término da vigência: 30 de novembro de 2018
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Parasitologia
• Pesquisador responsável: Sandra Marcia Muxel
• Beneficiário: Sandra Marcia Muxel
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Juliana Ide Aoki ; Lucile Maria Floeter-Winter
• Auxílio(s) vinculado(s): 18/23750-9 - Alterações na resposta imune inflamatória mediada via receptores Toll-like (TLRs) e microRNA-let-7e em macrófagos infectados com Leishmania amazonensis, PUB.ART
• Assunto(s): Leishmania Resposta imune Receptores toll-like Arginase MicroRNAs Macrófagos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: arginase | leishmania | Macrófagos | MicroRNAs | Resposta Imunológica | Toll like receptors | biologia molecular da interação patógeno-hospedeiro

Resumo

A regulação pós-transcricional mediada por microRNAs em processos infecciosos causados por bactérias, vírus e parasitas, assim como de células cancerígenas, vem sendo intensamente estudada nos últimos anos. A infeção promovida por Leishmania também é capaz de modular a expressão de miRNAs e esses regulam genes envolvidos na resposta do macrófago frente ao parasita. A modulação na expressão de miRNAs do macrófago promovida pelo parasita poderia inibir a produção de óxido nítrico (NO) direcionando a L-arginina para produção de poliaminas, através do aumento na expressão da arginase I do hospedeiro, o que resulta na sobrevivência e replicação do parasita. Ainda não foi elucidado como a sinalização mediada pelos receptores Toll-like (TLR) atua no processo de regulação de expressão de miRNAs e mRNAs-alvo em modelos de infecção por Leishmania amazonensis. O projeto está baseado na hipótese de que a expressão de microRNAs do hospedeiro seja modificada durante a entrada e replicação da L. amazonensis no macrófago, sendo mediada pelo reconhecimento através de receptores da imunidade inata, os TollLike Receptors (TLRs), como meio de subverter a resposta imune do hospedeiro. Deste modo, a ativação da sinalização via TLRs modularia a expressão de alguns miRNAs envolvidos no controle pós-transcricional da sinalização intracelular das vias dos receptores da imunidade inata, ou ainda a modulação da expressão de miRNAs regularia a ativação da via dos TLRs. Assim, a modulação dos miRNAs mediada por TLR, ou vice-versa, teria papel funcional na maturação do fagolisossomo, na ativação da produção de citocinas, na ativação da sinalização via NF-kB ou na via de produção de poliaminas/NO (arginase/NOS2). A idéia central deste projeto é investigar se as sinalizações via MyD88, TLR2 ou TLR4 durante a infecção de macrófagos promovem mudanças na composição de miRNAs do hospedeiro induzindo maior capacidade do macrófago em fagocitar e eliminar o parasita. Ainda, entender se a regulação na composição de miRNA devido a alteração na maneira de reconhecer o parasita contribui para a ativação dos macrófagos e resposta imune gerada durante a leishmaniose. Assim, este projeto tem como objetivo central avaliar a expressão de microRNAs em macrófagos oriundos de camundongos nocautes de MyD88, TLR2 ou TLR4 infectados por L. amazonensis e suas implicações na regulação de vias relacionadas a fagocitose, produção de poliaminas e NO e consequente sobrevivência do parasita. Os miRNAs que tiverem sua transcrição alterada e que possuam relevância para as vias estudadas serão utilizados como "candidatos" em estudos de silenciamento de sua expressão e impacto na infectividade. A execução do projeto tem potencial para gerar produtos em forma de artigos científicos e em conferências, para ampla divulgação do conhecimento, bem como formação intelectual e treinamento de alunos da graduação e pós-graduação. Ainda, os dados preliminares indicam a possível identificação e desenvolvimento de marcadores gênicos da infecção por L. amazonensis ou de inibidores específicos das vias descritas no projeto com o objetivo de controlar a infecção. (AU)

Publicações científicas

(6)

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

AOKI, JULIANA IDE; LARANJEIRA-SILVA, MARIA FERNANDA; MUXEL, SANDRA MARCIA; FLOETER-WINTER, LUCILE MARIA. The impact of arginase activity on virulence factors of Leishmania amazonensis. Current Opinion in Microbiology, v. 52, p. 110-115, DEC 2019. (17/23933-3, 14/50717-1, 16/03273-6, 16/19815-2)

MUXEL, SANDRA MARCIA; ACUNA, STEPHANIE MAIA; AOKI, JULIANA IDE; ZAMPIERI, RICARDO ANDRADE; FLOETER-WINTER, LUCILE MARIA. Toll-Like Receptor and miRNA-let-7e Expression Alter the Inflammatory Response in Leishmania amazonensis-Infected Macrophages. FRONTIERS IN IMMUNOLOGY, v. 9, NOV 29 2018. (16/03273-6, 17/23519-2, 14/20809-1, 14/50717-1, 16/19815-2)

MUXEL, SANDRA M.; AOKI, JULIANA I.; FERNANDES, JULIANE C. R.; LARANJEIRA-SILVA, MARIA F.; ZAMPIERI, RICARDO A.; ACUNA, STEPHANIE M.; MULLER, KARL E.; VANDERLINDE, RUBIA H.; FLOETER-WINTER, LUCILE M.. Arginine and Polyamines Fate in Leishmania Infection. FRONTIERS IN MICROBIOLOGY, v. 8, JAN 15 2018. (16/22896-4, 16/10461-3, 14/50717-1, 15/25942-4, 16/19815-2)

ACUNA, STEPHANIE MAIA; AOKI, JULIANA IDE; LARANJEIRA-SILVA, MARIA FERNANDA; ZAMPIERI, RICARDO ANDRADE; RIBEIRO FERNANDES, JULIANE CRISTINA; MUXEL, SANDRA MARCIA; FLOETER-WINTER, LUCILE MARIA. Arginase expression modulates nitric oxide production in Leishmania (Leishmania) amazonensis. PLoS One, v. 12, n. 11, NOV 14 2017. (14/50717-1, 15/25942-4, 16/19815-2)

RIBEIRO FERNANDES, JULIANE CRISTINA; AOKI, JULIANA IDE; ACUNA, STEPHANIE MAIA; ZAMPIERI, RICARDO ANDRADE; MARKUS, REGINA P.; FLOETER-WINTER, LUCILE MARIA; MUXEL, SANDRA MARCIA. Melatonin and Leishmania amazonensis Infection Altered miR-294, miR-30e, and miR-302d Impacting on Tnf, Mcp-1, and Nos2 Expression. FRONTIERS IN CELLULAR AND INFECTION MICROBIOLOGY, v. 9, MAR 20 2019. (16/19815-2, 16/03273-6, 12/15263-4, 14/50717-1, 17/23519-2)

FERNANDES, JULIANE C. R.; ACUNA, STEPHANIE M.; AOKI, JULIANA, I; FLOETER-WINTER, LUCILE M.; MUXEL, SANDRA M.. Long Non-Coding RNAs in the Regulation of Gene Expression: Physiology and Disease. NON-CODING RNA, v. 5, n. 1, p. 25-pg., 2019-03-01. (17/23519-2, 14/50717-1, 16/03273-6, 16/19815-2, 18/24693-9, 17/21906-9)