Decifrando SCI1, sua expressão durante o desenvolvimento floral e os mecanismos de ação para o controle da proliferação celular

• Processo: 16/20486-3
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Vigência: 01 de março de 2017 - 31 de agosto de 2019
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Maria Helena de Souza Goldman
• Beneficiário: Maria Helena de Souza Goldman
• Instituição Sede: Faculdade de Filosofia, Ciências e Letras de Ribeirão Preto (FFCLRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Proliferação celular Expressão gênica Mapeamento de interação de proteínas Quinases ciclina-dependentes Tabacum
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: desenvolvimento do pistilo | expressão gênica | Interação proteína-proteína | Proliferação celular | quinase dependente de ciclina | Sci1 | Genética Molecular de Plantas

Resumo

Este projeto pretende estudar a proteína SCI1 (Stigma/style Cell-cycle Inhibitor 1) de Nicotiana tabacum e os mecanismos pelos quais ela regula o desenvolvimento e influencia o tamanho final do órgão reprodutor feminino das plantas (pistilo). Notadamente, este projeto pretende avançar na compreensão de como SCI1 regula a proliferação celular. Os objetivos desse projeto são: 1) Investigar a hipótese da proteína SCI1 receber modificações pós-traducionais. Esta investigação será feita principalmente por espectrometria de massa da proteína extraída de estigmas/estiletes. 2) Confirmar e ampliar o conhecimento sobre o interactoma de SCI1 e NtCDKG;2. A análise dos clones resultantes do screening de duplo-híbrido em leveduras (Y2H), usando NtCDKG;2 como isca, será continuada. Adicionalmente, alguns parceiros identificados de interação com SCI1 serão testados com NtCDKG;2 e vice-e-versa, por Y2H e Bimolecular Fluorescence Complementation (BiFC). 3) Investigar a hipótese de SCI1 ter um papel em processos relacionados ao splicing de RNAs. Serão testadas as interações de SCI1 com a proteína NtU2a´(spliceossoma) e NtRS2Z33 (fator de splicing), além de alguns candidatos do objetivo 2. 4) Investigar a hipótese de SCI1 ter um papel em processos relacionados à transcrição de RNAs. Serão analisados os resultados do RNASeq de estigmas/estiletes de plantas selvagens e de RNAi de SCI1; identificados os genes diferencialmente expressos e realizados experimentos de RT-qPCR para confirmar os resultados. 5) Investigar a hipótese de SCI1 ser expresso no meristema floral e ter um papel no controle da proliferação celular neste meristema. Será feita a hibridização in situ de SCI1 em meristemas, a produção e análise de plantas transgênicas SCI1prom::SCI1-GFP e será iniciada a produção de plantas nocautes para SCI1, por CRISPR/Cas 9. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

CRUZ, JOELMA O.; SAN MARTIN, JUCA A. B.; LUBINI, GREICE; STRINI, EDWARD J.; SOBRAL, ROMULO; PINOTI, VITOR F.; FERREIRA, PEDRO B.; THOME, VANESSA; QUIAPIM, ANDREA C.; DORNELAS, MARCELO C.; et al. SCI1 Is a Direct Target of AGAMOUS and WUSCHEL and Is Specifically Expressed in the Floral Meristematic Cells. FRONTIERS IN PLANT SCIENCE, v. 12, MAR 18 2021. (19/24774-1, 16/20486-3)