Peptídeos Penetrantes de Células para Transporte de DNA plasmídial e microRNA: da Estrutura Nanoscópica a Entrega de Genes.

• Processo: 16/24409-3
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2017
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2019
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Biofísica - Biofísica Molecular
• Pesquisador responsável: Emerson Rodrigo da Silva
• Beneficiário: Emerson Rodrigo da Silva
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Cristiano Luis Pinto de Oliveira ; Ian William Hamley ; Sang Won Han ; Valeria Castelletto
• Assunto(s): Terapia genética Técnica de automontagem Física biológica
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Biofísica Molecular | DNA e RNA | Espalhamento de raios X a baixo ângulo | peptídeos penetrantes de células | self-assembly | terapia genica | Física Biológica

Resumo

Em fins da década de 1980, pesquisas relacionadas ao HIV conduziram à descoberta surpreendente de que certos domínios proteicos são capazes de transpor membranas eucarióticas. Essas sequências curtas, contendo tipicamente entre 5 e 40 aminoácidos, logo foram denominadas peptídeos penetrantes de células (CPPs) e seu potencial para a produção de vetores sintéticos aplicados à terapia gênica foi prontamente reconhecido. A literatura atual apresenta cerca 150 CPPs eficazes para o transporte de compostos bioativos; no entanto, análises detalhadas da organização nanoscópica de conjugados baseados em CPPs ainda são bastante escassas. Este cenário leva à ausência de informações fundamentais para se estabelecer correlações entre estrutura e transfecção, dificultando a otimização desses transportadores. Neste projeto, contribuiremos para o preenchimento dessas lacunas por meio de investigações sistemáticas acerca do ordenamento nanoscópico de conjugados de CPPs e ácidos nucleicos. Estudaremos complexos envolvendo tanto sequências circulares longas (4.7 kb) de DNA plasmidial quanto fragmentos de RNA (20-22 nt). A organização nanoscópica será elucidada por meio de uma combinação sofisticada de técnicas biofísicas envolvendo espalhamento de raios X e de nêutrons a baixo ângulo, difração de raios X em fibras, microscopia eletrônica e de força atômica e métodos espectroscópicos. Paralelamente, ensaios de transfecção serão realizados para investigar tanto a expressão quanto a supressão de proteína fluorescente verde em células de mamíferos para revelar o papel da estrutura na eficiência desses vetores. Como objetivo final, pretendemos identificar aspectos estruturais comuns a diferentes tipos de CPPs e, a partir desses traços universais, produzir novos CPPs com estrutura otimizada para transfecção. (AU)

Publicações científicas

(11)

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

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