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Diagnóstico precoce de candidemia em pacientes críticos: análise comparativa entre os métodos de PCR em tempo real, MALDI-TOF e detecção de 1,3-beta-D-glucana

Processo: 17/00231-3
Linha de fomento:Auxílio à Pesquisa - Regular
Vigência: 01 de novembro de 2017 - 31 de outubro de 2019
Área do conhecimento:Ciências da Saúde - Medicina - Clínica Médica
Pesquisador responsável:Gilda Maria Barbaro Del Negro
Beneficiário:Gilda Maria Barbaro Del Negro
Instituição-sede: Instituto de Medicina Tropical de São Paulo (IMT). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
Pesq. associados:Edson Abdala ; Flávia Rossi ; João Nóbrega de Almeida Júnior ; Marcello Mihailenko Chaves Magri
Assunto(s):Candidemia  Candida  Técnicas e procedimentos de laboratório  Glucana 1,3-beta-glucosidase  Estudo comparativo  Reação em cadeia da polimerase em tempo real  Espectrometria de massas por ionização e dessorção a laser assistida por matriz 

Resumo

As infecções sistêmicas causadas por Candida spp. representam importante causa de morbidade e mortalidade em pacientes internados em unidades de cuidados intensivos (UCI), e estão associadas ao aumento no tempo e nos custos de internação. Apesar da importância crescente desta levedura como agente etiológico de infecções graves, particularmente em pacientes críticos, o desempenho dos métodos para diagnóstico precoce ainda permanecem um desafio na prática clínica. As hemoculturas, consideradas até hoje como padrão-ouro no diagnóstico dessas infecções, apresentam sensibilidade muito limitada e/ou demandam tempo prolongado para a identificação das espécies infectantes. O emprego das técnicas moleculares, como a PCR em tempo real, para a detecção de Candida diretamente em amostras clínicas tem sido relatado em diversas publicações, demonstrando resultados promissores. No entanto, a falta de padronização do método e de sua validação clínica, tem dificultado sua aplicação em laboratórios de rotina diagnóstica. Novos estudos devem ser conduzidos para permitir avanços em sua padronização e garantir maior confiabilidade nos resultados. A técnica de espectrometria de massa do tipo MALDI-TOF possui elevada acurácia para a identificação de micro-organismos e, nos últimos anos, esta tecnologia tem sido avaliada para detectar e identificar o patógeno diretamente em balões de hemocultura positivos, permitindo resultados em menor tempo e com menor custo. Este estudo tem como finalidade avaliar a acurácia da PCR em tempo real (método in house) para a detecção e identificação de cinco espécies de Candida, diretamente em amostras sanguíneas de 150 pacientes adultos, com hipótese diagnóstica de candidemia, atendidos em UCIs de dois hospitais públicos da cidade de São Paulo. Os pacientes serão classificados de acordo com os critérios estabelecidos pelo EORTC/MSG como tendo candidemia possível, provável ou provada. O teste para detecção de 1,3-²-D-glucana será empregado como um marcador sorológico de infecção fúngica, podendo confirmar os resultados positivos da PCR, nos casos em que as hemoculturas forem negativas. Os resultados de ambos os testes serão comparados aos das hemoculturas (método padrão-ouro) e serão determinados os valores de sensibilidade, especificidade, e valores preditivos positivos e negativos dos três métodos. Será avaliado o desempenho da técnica de MALDI-TOF para a correta identificação das espécies de Candida, diretamente nos balões de hemocultura positivos. (AU)

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