Estudos sobre mecanismos de diferenciação celular durante o desenvolvimento embrionário inicial em bovinos

• Processo: 17/09576-3
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Jovens Pesquisadores
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2017
• Data de Término da vigência: 31 de maio de 2023
• Área do conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Marcelo Demarchi Goissis
• Beneficiário: Marcelo Demarchi Goissis
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: José Antonio Visintin ; Mayra Elena Ortiz D' Avila Assumpcao
• Bolsa(s) vinculada(s): 22/02748-1 - Efeito da estimulação da via mTOR durante cultivo embrionário em ausência ou presença de glicose sobre a diferenciação do trofectoderma em embriões bovinos., BP.MS; 19/22798-0 - Efeito do fator de crescimento de fibroblasto 4 (FGF4) na diferenciação do endoderma primitivo em embriões bovinos, BP.IC; 19/21303-8 - Efeito da inibição dos receptores de fator de crescimento fibroblástico na diferenciação do endoderma primitivo em embriões bovinos produzidos in vitro, BP.IC; + mais bolsas vinculadas 19/22649-5 - Avaliação funcional do gene NANOG na segregação de linhagens celulares em embriões bovinos, BP.MS; 19/03014-9 - Inserção de gene repórter fluorescente em região gênica de Sox2 para estudo da diferenciação celular no desenvolvimento embrionário inicial bovino, BP.MS; 18/18924-8 - Influência da via de sinalização HIPPO na segregação entre a massa interna celular e o trofectoderma em embriões bovinos, BP.MS; 18/08285-8 - Influência da contratilidade celular na formação do domínio apical e na segregação de linhagens celulares no embrião bovino, BP.IC; 17/25574-0 - Estudos sobre mecanismos de diferenciação celular durante o desenvolvimento embrionário inicial em bovinos, BP.JP - menos bolsas vinculadas
• Assunto(s): Diferenciação celular Embriogênese animal Endoderma Bovinos Mamíferos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: bovinos | Cas9 | Crispr | Endoderma Primitivo | Epiblasto | massa interna celular | trofectoderma | Embriologia e Biotecnologia da Reprodução

Resumo

Os primeiros eventos de diferenciação celular em mamíferos ocorrem antes da implantação embrionária. Estes consistem na separação entre a massa celular interna e o trofectoderma, seguida pela separação entre epiblasto e endoderma primitivo dentro da massa celular interna. Os mecanismos moleculares que controlam essa diferenciação podem envolver desde polarização celular à expressão temporal de fatores de transcrição específicos. Dados recentes indicam que o desenvolvimento embrionário inicial bovino seria um bom modelo para humanos. O presente projeto visa estudar diferentes mecanismos que possam estar relacionados a diferenciação das primeiras linhagens celulares no desenvolvimento do embrião. São propostos experimentos para testar hipóteses relacionadas ao primeiro e segundo eventos de diferenciação celular embrionária. Pretende-se avaliar a influência da polarização celular e a atividade da via de sinalização Hippo na segregação de massa interna celular e trofectoderma; para depois tentar identificar fatores pontuais que controlem esse evento. Será também testada a participação dos fatores de transcrição NANOG e GATA6 na separação do epiblasto e endoderma primitivo. Os experimentos envolverão o uso de moléculas inibidoras, edição gênica mediada por CRISPR/Cas9 e avaliação global da expressão gênica de células individualizadas. Espera-se com este projeto obter uma maior compreensão dos mecanismos envolvidos nas primeiras decisões de diferenciação do embrião bovino. O maior conhecimento desses mecanismos pode auxiliar no entendimento de problemas associados à técnicas de fertilização in vitro, clonagem e cultivo de células pluripotentes. (AU)

Publicações científicas

(6)

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

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LUEDKE, FELIPE EDUARDO; DA COSTA, CAROLINE PEREIRA; MENDES, CAMILLA MOTA; DOS SANTOS HAMILTON, THAIS ROSE; MILAZZOTTO, MARCELLA PECORA; ASSUMPCAO, MAYRA E. O. A.; GOISSIS, MARCELO DEMARCHI. Effects of fetal bovine serum on trophectoderm and primitive endoderm cell allocation of in vitro-produced bovine embryos. ZYGOTE, v. 31, n. 1, p. 7-pg., 2022-10-24. (18/18924-8, 17/09576-3, 19/03014-9, 17/25574-0)

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DOS ANJOS, S. A. A.; DA COSTA, C. P.; ASSUMPCAO, M. E. O. A.; VISINTIN, J. A.; GOISSIS, M. D.. Inhibition of apical domain formation does not block blastocyst development in bovine embryos. REPRODUCTION FERTILITY AND DEVELOPMENT, v. 33, n. 10, p. 665-673, AUG 11 2021. (17/09576-3, 18/08285-8, 18/18924-8, 17/25574-0)

CARREIRO, LETICIA ESCOBAR; DOS SANTOS, GABRIEL SIQUEIRA; LUEDKE, FELIPE EDUARDO; GOISSIS, MARCELO DEMARCHI. ell differentiation events in pre-implantation mouse and bovine embryo. ANIMAL REPRODUCTION, v. 18, n. 4, 2021. (19/22649-5, 19/21303-8, 19/03014-9, 17/09576-3)

LETÍCIA ESCOBAR CARREIRO; GABRIEL SIQUEIRA DOS SANTOS; FELIPE EDUARDO LUEDKE; MARCELO DEMARCHI GOISSIS. Cell differentiation events in pre-implantation mouse and bovine embryos. Animal Reproduction, v. 18, n. 4, 2022-01-07. (19/21303-8, 19/03014-9, 19/22649-5, 17/09576-3)