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Caracterizacao genomica do gene thi1 de arabidopsis thaliana variedade landsberg.

Processo: 98/06211-1
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Mestrado
Vigência (Início): 01 de agosto de 1998
Vigência (Término): 30 de novembro de 2000
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
Pesquisador responsável:Marie-Anne van Sluys
Beneficiário:Leonardo Paiva Farias
Instituição-sede: Instituto de Biociências (IB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
Assunto(s):Reparo do DNA   Arabidopsis thaliana

Resumo

Utilizando a metodologia de complementação funcional heteróloga foi clonado um gene de Arabidopsis thaliana capaz de complementar funcionalmente fenótipos de sensibilidade bacteriana a agentes genotóxicos. O cDNA clonado apresentou homologia a quatro diferentes domínios protéicos: um peptídeo sinal para direcionamento aos cloroplastos, um domínio de ligação aos dinucleotídeos, um domínio de ligação à molécula de DNA e dois domínios correspondentes à DNA polimerases bacterianas. Análises posteriores deste gene mostraram uma alta homologia com genes de fungos e plantas, quase todos caracterizados como genes envolvidos na síntese de tiamina. Devido a alta homologia entre o cDNA clonado e o gene THI4 de levedura, (51,6% de identidade e 63,6% de similaridade) foi testada a capacidade do gene de planta complementar o mutante de levedura auxotrófico para tiamina. Em função deste resultado iniciaram-se, em nosso laboratório estudos da complementação de mutantes de Arabidopsis thaliana (deficientes na síntese de tiamina) com o gene thil. Este projeto visa o isolamento e caracterização do clone genômico de thil. Após o seqüenciamento do clone isolado, pretende-se definir a região promotora deste gene. A análise desta região com auxílio de genes marcadores abre perspectivas para o estudo dos fatores envolvidos na regulação da expressão gênica de thil. (AU)