Caracterizacao genomica do gene thi1 de arabidopsis thaliana variedade landsberg.

• Processo: 98/06211-1
• Linha de fomento: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Vigência (Início): 01 de agosto de 1998
• Vigência (Término): 30 de novembro de 2000
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Marie-Anne van Sluys
• Beneficiário: Leonardo Paiva Farias
• Instituição-sede: Instituto de Biociências (IB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Reparo do DNA Arabidopsis thaliana

Resumo

Utilizando a metodologia de complementação funcional heteróloga foi clonado um gene de Arabidopsis thaliana capaz de complementar funcionalmente fenótipos de sensibilidade bacteriana a agentes genotóxicos. O cDNA clonado apresentou homologia a quatro diferentes domínios protéicos: um peptídeo sinal para direcionamento aos cloroplastos, um domínio de ligação aos dinucleotídeos, um domínio de ligação à molécula de DNA e dois domínios correspondentes à DNA polimerases bacterianas. Análises posteriores deste gene mostraram uma alta homologia com genes de fungos e plantas, quase todos caracterizados como genes envolvidos na síntese de tiamina. Devido a alta homologia entre o cDNA clonado e o gene THI4 de levedura, (51,6% de identidade e 63,6% de similaridade) foi testada a capacidade do gene de planta complementar o mutante de levedura auxotrófico para tiamina. Em função deste resultado iniciaram-se, em nosso laboratório estudos da complementação de mutantes de Arabidopsis thaliana (deficientes na síntese de tiamina) com o gene thil. Este projeto visa o isolamento e caracterização do clone genômico de thil. Após o seqüenciamento do clone isolado, pretende-se definir a região promotora deste gene. A análise desta região com auxílio de genes marcadores abre perspectivas para o estudo dos fatores envolvidos na regulação da expressão gênica de thil. (AU)