Resumo
Este projeto pretende dar continuidade ao trabalho de mestrado do aluno Ernani Pinto Junior, onde foram isolados, identificados e quantificados os carotenóides presentes em Gonyaulax polyedra, bem como determinada a ação protetora da peridinina contra os efeitos deletérios do oxigênio singlete (O2 (1deltag)). Para isso, algas como Minutocellus polymorphus, Tetraselmis gracilis, Gracilaria tenuistipitata, Kappaphycus alvarezii e outras espécies serão analisadas a fim de se isolar e identificar os carotenóides presentes. JTambém, pretende-se verificar alterações na biossíntese de carotenóides de diferentes espécies cultivadas em situações que promovam estresse oxidativo. Para tanto, estudaremos por HPLC, a biossíntese de carotenóides em algas marinhas expostas a metais pesados, ultravioleta e algumas drogas inibidoras da biossíntese destas substâncias. Estaremos também, medindo os níveis de 8-oxodGuo formados no cloroplasto e nas células nas situações descritas acima. Através de técnicas cromatográficas como TLC (Thin Layer Chromatography), Chromatotron®, Sephadex LH-20 e HPLC (High Performance Liquid Chromatography) preparativo, iniciaremos o isolamento dos carotenóides. Usando técnicas espectrométricas como Ressonância Magnética Nuclear de próton (RMN de 1H) e de carbono (RMN de 13C), espectrometria de massa e outras, caracterizaremos estruturalmente os carotenóides. Novamente, por HPLC analítico, quantificaremos os carotenóides e usando um detecto eletroquímico (HPLC-ECD) determinaremos os níveis de 8-oxodGuo. Com os dados obtidos, pretendemos mostrar as possíveis alterações na biossíntese de carotenóides e suas implicações, quando comparados com marcadores de oxidação celular como 8-oxodGuo e produtos da peroxidação lipídica. (AU)
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