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Diversidade genetica da toxina termo-labil de escherichia coli enterotoxigenica ( etec ) e potenciais aplicacoes biotecnologicas.

Processo: 02/13649-0
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Doutorado
Vigência (Início): 01 de abril de 2003
Vigência (Término): 31 de março de 2006
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Microbiologia - Microbiologia Aplicada
Pesquisador responsável:Luis Carlos de Souza Ferreira
Beneficiário:Melissa Ang Simoes Lasaro
Instituição-sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
Assunto(s):Diversidade

Resumo

O projeto tem como principais objetivos a continuidade dos estudos voltados para a determinação da diversidade genética encontrada no óperon ext, responsável pela síntese da toxina termo-lábil (LT), em linhagens de Escherichia coli enterotoxigênica (ETEC) por meio de técnicas de fragmentação de DNA genômico e seqüenciamento de bases. Propõe-se o aprofundamento da análise iniciada com amostras de ETEC isoladas no estado de São Paulo com ênfase para linhagens pertencentes aos sorotipos O6:H16, O78:H12 e O128:H12, cepas de reconhecida capacidade patogênica e produtoras tanto da toxina LT como da toxina termo-estável (ST), e amostras de ETEC isoladas de pacientes assintomáticos produtoras apenas da toxina LT e pertencentes a sorotipos diversos. O trabalho de doutoramento prevê ainda a clonagem, expressão e purificação das toxinas LT, selvagem e variantes, em particular uma variante identificada durante o mestrado da aluna que codifica para uma forma mutada na subunidade A2 (LT G196D, K213E) com toxicidade reduzida em ensaios feitos com células em cultura. As toxinas purificadas serão avaliadas quanto às propriedades tóxicas, tanto in vitro como in vivo, e imunomoduladoras, como o efeito adjuvante em mucosas e transcutâneo. O trabalho proposto representa uma importante contribuição para o conhecimento da diversidade natural e mecanismo de ação da LT e poderá trazer desdobramentos biotecnológicos interessantes no que tange o... (AU)

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