Padronizacao da tecnica de nested-pcr em unico tubo para deteccao de parvovirus humano b19.

• Processo: 00/07574-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Vigência (Início): 01 de outubro de 2000
• Vigência (Término): 30 de setembro de 2001
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Microbiologia - Microbiologia Aplicada
• Pesquisador responsável: Saulo Duarte Passos
• Beneficiário: Daniele Vicari
• Instituição Sede: Pró-Reitoria de Pós-Graduação (PRO-PGRAD). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Exantema Reação em cadeia por polimerase (PCR) Eritema infeccioso
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Eritema Infeccioso | Exantema | Nested-Pcr | Parvovirus B19

Resumo

O Parvovírus Humano B19 é um vírus de difícil cultivo em células convencionais, assim a detecção genômica é o método mais sensível e específico possibilitando, inclusive o diagnóstico em pacientes imunodeprimidos e recém-nascidos. A técnica de Nested-PCR apresenta alta sensibilidade e especificidade para a detecção do Parvovírus Humano B19, devido ao processo de dupla amplificação. Contudo, a alta sensibilidade da Nested-PCR, aumenta a probabilidade de contaminação com a manipulação do produto previamente amplificado, durante a transferência para a segunda etapa de amplificação. Este projeto propõe a padronização da técnica de Nested-PCR em um único tubo, com a finalidade de reduzir o risco de contaminação por carregamento (manuseio do material previamente amplificado), tempo de execução e custos. Assim podendo verificar sua aplicação nas amostras obtidas no Hospital de Clínicas de Franco da Rocha-DIR IV e sua utilização como diagnóstico em um Laboratório de Virologia no próprio complexo hospitalar. (AU)