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Investigacao do efeito do tak-778 na interacao osteoblasto osteoclasto.

Processo: 06/02868-4
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Doutorado
Vigência (Início): 01 de janeiro de 2007
Vigência (Término): 28 de fevereiro de 2010
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Farmacologia
Pesquisador responsável:Adalberto Luiz Rosa
Beneficiário:Larissa Sverzut Bellesini
Instituição-sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil

Resumo

O TAK-778 é um composto capaz de estimular a osteogênese in vitro e in vivo. Células da linhagem osteoblástica sintetizam e secretam citocinas que agem por meio de mecanismos parácrinos no controle da osteoclastogênese. Entretanto, até o presente momento, nenhum estudo foi realizado para avaliar o efeito do TAK-778 na formação e ativação de osteoclastos. Portanto, o objetivo do presente estudo será investigar o efeito do TAK-778 em osteoclastos e na interação entre osteoblastos e osteoclastos. Células precursoras de osteoclastos, obtidas de medula óssea humana, serão cultivadas em presença de veículo (controle) e TAK-778 (10-5M). Para avaliar o efeito do TAK-778 na interação osteoblasto/osteoclasto, osteoclastos serão cultivados em meio de cultura condicionado por osteoblastos, cultivados em presença de veículo (controle) e TAK-778(10-5M). Ao final de 7 dias em cultura, serão avaliados os seguintes parâmetros: 1) Expressão dos genes RANKL, OPG, IL-1, IL-6, IL-11 e TNF-alpha, em osteoblastos humanos, por meio da técnica de real time PCR; 2) Conteúdo das citocinas RANKL, OPG, IL-1, IL-6, IL-11 e TNF-alpha e, de prostaglandina PGE2, em osteoblastos humanos, por meio da técnica de ELISA; 3) Formação e ativação osteoclástica, por meio de coloração para fosfatase ácida (TRAP) e ensaio de reabsorção óssea. Os experimentos serão realizados em triplicata e os dados serão submetidos à análise de variância (ANOVA) seguida do teste de Bonferroni ou ao teste T, quando apropriado.

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