Acao do amblyomin-x em diferentes linhagens celulares normais e tumorais.

• Processo: 07/55628-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2008
• Data de Término da vigência: 30 de novembro de 2010
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Ana Marisa Chudzinski-Tavassi
• Beneficiário: Paulo Luiz de Sá Júnior
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Apoptose Análise de sequência com séries de oligonucleotídeos Coagulação sanguínea
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Apoptose | Coagulacao Sanguinea | Metastase E Angiogenese | Microambiente E Ciclo Celular | Microarrays

Resumo

A proteína recombinante Amblyomin-X, com atividade inibidora de Fator Xa e caracterizada como um inibidor do tipo Kunitz, foi obtido a partir de uma biblioteca de cDNA de glândulas salivares do carrapato Amblyomma cajennense (Processo 00/14067-0). Quando testada em diferentes linhagens celulares, a proteína apresentou atividade apoptótica de células tumorais (melanoma humano-SKMEL28, MEL85, MEWO, melanoma murino B16F10, tumor de mama MCF7) in vitro e atividade anti-tumoral in vivo (melanoma murino B16F10), bem como atividade antimetastática e anti-angiogênica. Já foi demonstrado também que esta proteína recombinante não possui atividade em células normais como células endoteliais humanas derivadas de cordão umbilical (HUVECs), fibroblastos e plaquetas. Assim, o Amblyomin abre perspectiva para um novo agente anti-tumoral, anti-metastático e anti-angiogênico, com patente depositada no Instituto Nacional de Proteção Industrial (INPI, PI 0406057-1) em co-titularidade com a FAPESP. No presente projeto será avaliado o mecanismo de ação do Amblyomin-X sobre culturas de linhagens tumorais e normais. Para tanto, serão avaliados os efeitos desta molécula no ciclo celular, por citometria de fluxo; a ação no microambiente celular através da análise de moléculas liberadas no sobrenadante das culturas, principalmente moléculas relacionadas à angiogênese, inflamação, coagulação e fibrinólise; e finalmente a modulação da expressão de genes relacionados com apoptose, angiogênese, inflamação, coagulação e fibrinólise em células tumorais comparada à modulação gênica em células normais de tecido correlacionado. (AU)