Clonagem e expressão da proteína imunossupressora do veneno da serpente Lachesis muta

• Processo: 07/50558-7
• Linha de fomento: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Vigência (Início): 01 de julho de 2007
• Vigência (Término): 31 de março de 2009
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Imunologia - Imunoquímica
• Pesquisador responsável: Denise Vilarinho Tambourgi
• Beneficiário: Giselle Pidde Marques Porto
• Instituição-sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 98/14307-9 - Center for Applied Toxinology, AP.CEPID
• Assunto(s): Biblioteca gênica Imunossupressão

Resumo

Estudos sobre a baixa produção de anticorpos neutralizantes contra o veneno de serpentes do gênero Lachesis permitiram a identificação de um fator imunossupressor presente no veneno da espécie L. muta, designado LMVp. Com o propósito de contribuir para o melhor entendimento do mecanismo supressor desta proteína sobre a resposta imune humoral e, consequentemente, para avaliar uma possível aplicação da atividade imunossupressora em pesquisas científicas e/ou tratamentos clínicos, este trabalho tem como objetivos a clonagem e caracterização da LMVp. A LMVp foi purificada da fração com atividade imunossupressora do veneno de L. muta e submetida à análise por espectrometria de massas. Fragmentos da proteína foram seqüenciados e, a partir dessas seqüências de aminoácidos, foram desenhados "primers" degenerados para a obtenção do cDNA codificante para a LMVp, utilizando a técnica de RT-PCR. Foram selecionados dois clones, nomeados Lr23 e Lr100, com similaridade significativa com a seqüência primária da LMVp nativa. Com a intenção de caracterizar as proteínas codificadas pelos clones isolados, as seqüências deduzidas de aminoácidos foram submetidas a análise por Bioinformática, sendo que suas seqüências primárias e secundárias foram estudadas e comparadas, obtendo-se modelos estruturais para ambos os clones. Os cDNAs foram subclonados no vetor pRSET-A para expressão em E. coli e, no momento, estão sendo estabelecidas as condições para purificação das proteínas recombinantes para sua caracterização. (AU)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

PORTO, Giselle Pidde Marques. Clonagem e expressão da proteína imunossupressora do veneno da serpente Lachesis muta. 2009. 123 f. Tese de Doutorado - Universidade de São Paulo (USP). Instituto de Biociências São Paulo.