| Processo: | 07/00398-3 |
| Modalidade de apoio: | Bolsas no Brasil - Doutorado |
| Data de Início da vigência: | 01 de julho de 2007 |
| Data de Término da vigência: | 30 de junho de 2011 |
| Área de conhecimento: | Ciências da Saúde - Farmácia |
| Pesquisador responsável: | Rosario Dominguez Crespo Hirata |
| Beneficiário: | Fabiana Dalla Vecchia Genvigir |
| Instituição Sede: | Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCF). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil |
| Assunto(s): | Farmacogenética Hipercolesterolemia Expressão gênica |
| Palavra(s)-Chave do Pesquisador: | Abca1 | Atorvastatina | expressão gênica | Farmacogenética | Farmacogenômica | hipercolesterolemia | Farmacogenética |
Resumo A ATP-binding cassette transporter A1 (ABCA1) é uma proteína transmembrana responsável pelo efluxo celular de colesterol e fosfolipídeos que é um passo essencial para o transporte reverso do colesterol. Polimorfismos do gene ABCA1 foram associados com risco de doença arterial coronariana, variações no perfil lipídico e diferenças na resposta a fármacos hipocolesterolemiantes. Recentemente, nós mostramos que a atorvastatina, um potente inibidor da HMGCoA redutase, tem um efeito significante na expressão de RNAm do ABCA1 em células mononucleares do sangue periférico de pacientes hipercolesterolêmicos e este efeito foi associado com o polimorfismo R219K. Neste estudo, serão avaliados os efeitos da atorvastatina sobre a expressão da ABCA1, em células das linhagens HepG2 e Caco-2 e em linfócitos humanos de pacientes hipercolesterolêmicos tratados com atorvastatina (n=30). RNA total e proteínas serão extraídos de células em cultura após incubação com atorvastatina (0 a 20 µM por 24hs). A porcentagem de células viáveis tratadas com atorvastatina será determinada por citometria de fluxo, utilizando uma solução de iodeto de propídio (50 mg/mL em tampão salina fosfato). A expressão de RNAm e de proteína será avaliada por RT-PCR em tempo real e Western blot e citometria de fluxo, respectivamente. A análise de efluxo de colesterol e fosfolipídeos será quantificada através da contagem de cintilações beta. A estabilidade do RNAm do gene ABCA1 será analisada por Northern Blotting. O efeito da atorvastatina na ativação de fatores de transcrição (AP-1, SP-1, HNF3beta; e LXRalfa/beta;) do gene ABCA1 será avaliada por EMSA. As possíveis relações do polimorfismo -105C>T do gene ABCA1 com a expressão gênica, com a estabilidade de RNAm do ABCA1 e com a atividade dos fatores de transcrição e do polimorfismo R219K do ABCA1 com o efluxo de colesterol e fosfolipídeos será avaliada em linfócitos humanos. Os resultados deste estudo contribuirão para o conhecimento do papel do transportador ABCA1 no mecanismo de variabilidade da resposta terapêutica a atorvastatina. | |
| Matéria(s) publicada(s) na Agência FAPESP sobre a bolsa: | |
| Mais itensMenos itens | |
| TITULO | |
| Matéria(s) publicada(s) em Outras Mídias ( ): | |
| Mais itensMenos itens | |
| VEICULO: TITULO (DATA) | |
| VEICULO: TITULO (DATA) | |