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Avaliação do envolvimento da galatrox, uma lectina ligante de lactose isolada da peçonha de bothtrops atrox, no processo inflamatório

Processo: 07/57007-6
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Mestrado
Vigência (Início): 01 de março de 2008
Vigência (Término): 28 de fevereiro de 2010
Área do conhecimento:Ciências da Saúde - Farmácia
Pesquisador responsável:Suely Vilela
Beneficiário:Marco Aurélio Sartim
Instituição-sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (FCFRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
Assunto(s):Hemaglutinação   Imunização   Lectinas

Resumo

As lectinas são proteínas que reconhecem carboidratos de modo específico podendo participar de vários processos fisiológicos, como a inflamação, além de serem usadas como ferramentas em estudos biológicos e biotecnológicos. Várias lectinas já foram descritas a partir de peçonhas de serpentes. Recentemente, foi purificada do veneno Bothrops atrox uma lectina com propriedades bioquímicas e funcionais semelhantes à de outras lectinas do gênero Bothrops, denominada galatrox. A avaliação preliminar sugere um possível caráter anti-inflamatório da galatrox.Este trabalho tem como objetivos o aprofundamento da investigação sobre a participação dessa lectina no processo inflamatório e a produção de anticorpos policlonais anti-galatrox. A galatrox será obtida a partir de veneno bruto de B. atrox por cromatografia de afinidade e de exclusão molecular. A capacidade da galatrox de induzir e/ou inibir a migração de leucócitos será investigada por ensaios in vivo e/ou in vitro. A expressão de citocinas inflamatórias será analisada por "ELISA" nos lavados peritoneais e da cavidade "air pouch" assim como nos soros dos animais-teste. Além disso, macrófagos peritoneais de camundongos serão tratados in vitro com galatrox (1 a 100μg) e os sobrenadantes das culturas serão analisados por "ELISA" para as citocinas TNF-α, IL-1, IL-5, IL-6 e KC. A avaliação dos níveis de oxido nítrico nas amostras biológicos e a produção de radicais livres de oxigênio em neutrófilos humanos serão realizadas por reação de Griess e quimiluminescência, respectivamente. Será também avaliada a expressão protéica do inibidor de NFK-b por "westem blot". A produção de anticorpos será realizada por imunização em coelhos (4 vezes de 100μg por coelho) e os anticorpos policlonais serão purificados por afinidade com monitoração por "ELISA" e "Western blot". Esse trabalho poderá contribuir para a caracterização funcional da galotrox, além de gerar informações aplicáveis ao desenvolvimento de novas ferramentas experimentais e/ou estratégias terapêuticas relacionadas a doenças inflamatórias e autoimunes. (AU)

Publicações acadêmicas
(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)
SARTIM, Marco Aurélio. Avaliação do envolvimento da Galatrox, uma lectina ligante de lactodr isolada da peçonha de Bothrops atrox, no processo inflamatório. 2010. Dissertação de Mestrado - Universidade de São Paulo (USP). Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto Ribeirão Preto.

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