Estudo da variabilidade genetica de antigenos de superficie gp82 e gp90 de tripomastigotas metaciclicos de trypanosoma cruzi: identificacao do repertorio dos transcritos por hibridizacao em...

• Processo: 07/58593-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2008
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2011
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: José Franco da Silveira Filho
• Beneficiário: Paulo Roberto Ceridório Corrêa
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 06/61450-0 - Estudos moleculares do Trypanosoma cruzi e de sua interação com células e fatores do hospedeiro in vitro e in vivo, AP.TEM
• Assunto(s): Análise de sequência com séries de oligonucleotídeos Antígenos de superfície Trypanosoma cruzi Expressão gênica
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Antigenos De Superficie | Expressao Genica | Glicoproteinas Gp90 E Gp82 | Microarranjos De Dna | Trypanosoma Cruzi | Variabilidade Antigenica

Resumo

O Trypanosoma cruzi é um protozoário flagelado causador da doença de Chagas. O tripomastigota metacíclico, uma das formas infecciosas do parasita, expressa na sua superfície glicoproteínas estágio-específico envolvidas nos processos de adesão e penetração do parasita na célula do hospedeiro mamífero. Os antígenos de superfície que são codificados por famílias multigênicas cujos membros podem ser diferencialmente expressos nas diferentes formas evolutivas do parasita. O estudo de famílias multigênicas que codificam fatores de virulência do T. cruzi é de grande importância na identificação de novos reagentes diagnósticos, antígenos para vacinação, marcadores de virulência, etc. É fundamental identificarmos os genes expressos na forma metacíclica e se os transcritos dos mesmos são direcionados para a tradução. Existem evidências de que o controle da expressão gênica em T. cruzi ocorre ao nível pós-transcricional agindo no direcionamento dos transcritos a serem traduzidos para o para o compartimento polissomal. Pretendemos estabelecer o perfil de genes de antígenos de superfície na forma metacíclica. Para alcançar este objetivo, nós construiremos um microarranjo protótipo contendo seqüências das famílias multigênicas que codificam antígenos de superfície e 20 seqüências gênicas conhecidas como controle interno. Os microarranjos serão hibridizados com o RNA polissomal de formas epimastigotas (não infecciosas) e tripomastigotas metacíclicos. A expressão preferencial dos genes formas metacíclicas será confirmada por dosagem dos transcritos por RT-PCR em tempo real, hibridização por "northern blot" e análise da proteína por "western blotting" e imunofluorescência. (AU)