Caracterizacao de mutantes condicionais do gene da desoxi-hipusina sintase em saccharomyces cerevisiae

• Processo: 08/56544-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2009
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2011
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Cleslei Fernando Zanelli
• Beneficiário: Fabio Carrilho Galvão
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCFAR). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil
• Assunto(s): Saccharomyces cerevisiae Fator de iniciação 5A em eucariotos TIF51A
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Dys1 | Elf5A | Hiposinacao | Saccharomyces Cerevisiae | Tif51A

Resumo

O fator de início de tradução 5A (elF5A) é altamente conservado de arqueas a mamíferos. Este fator já foi relacionado a início de tradução, transporte nucleocitoplasmático, decaimento de mRNA e proliferação celular. Mais recentemente, seu evolvimento no processo da tradução tem sido confirmado por diferentes estudos, mas sua função específica na síntese protéica permanece não estabelecida. eIF5A sofre uma modificação pós-traducional única e essencial, em que uma lisina específica é convertida em um resíduo de hipusina. Essa modificação ocorre em duas etapas: inicialmente, a enzima desoxi-hipusina sintase (DYS1) transfere o radical aminobutil da poliamina espermidina para o aminogrupo de um resíduo especifico de lisina de eIF5A (K51) para formar o resíduo de desoxi-hipusina. A seguir, outra enzima, chamada desoxi-hipusina hidroxilase (LIA1), realiza a hidroxilação da desoxi-hipusina, gerando, então, o resíduo de hipusina. Apesar de a segunda etapa da hípusinação (hidroxilação) não estar presente ou não ser essencial em todos os organismos que possuem eIF5A, a primeira etapa (desoxi-hipusinação) está presente desde arqueas a mamíferos e é essencial para que eIF5A seja funcional. Apesar de sua essencialidade, a função do resíduo de hipusina em eIF5A é ainda desconhecida e o fato de não existirem até o momento mutantes condicionais de DYS1 em S. cerevisiae tem limitado seus estudos em levedura, uma vez que se trata de um gene essencial. Recentemente em nosso laboratório, 2 mutantes condicionais de DYS1 foram identificados: dys1Δ1-28, sensível ao aumento de temperatura (ts) e dys1W75R/T118A/A147T, o qual, além de ser ts, cresce apenas na presença de estabilizador osmótico, como sorbitol 1 M. Assim, este projeto tem como objetivo utilizar estes mutantes condicionais de DYS1 em diferentes ensaios funcionais e de caracterização fenotípica para contribuir no entendimento não só da função da hípusinação sobre elF5A, mas também para o entendimento do papel de eIF5A na célula. (AU)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

GALVÃO, Fabio Carrilho. Caracterização de mutantes condicionais do gene da desoxi-hipusina sintase em Saccharomyces cerevisiae. 2011. Dissertação de Mestrado - Universidade Estadual Paulista (Unesp). Faculdade de Ciências Farmacêuticas. Araraquara Araraquara.