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Análise funcional de alfa/beta hidrolases de interesse biotecnológico

Processo: 09/51756-2
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Doutorado
Vigência (Início): 01 de outubro de 2009
Vigência (Término): 31 de agosto de 2013
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
Pesquisador responsável:Anete Pereira de Souza
Beneficiário:Lilian Luzia Beloti
Instituição-sede: Centro de Biologia Molecular e Engenharia Genética (CBMEG). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
Assunto(s):Expressão de proteínas   Caracterização estrutural   Purificação de proteínas   Metagenômica   Hidrolases

Resumo

Este projeto tem como foco principal a caracterização de diferentes hidrolases com potencial biocatalítico. Visando à aplicação das mesmas em diversos campos da indústria. As hidrolases em questão são lípases, proteases e epóxido hidrolases (EH) que serão isoladas a partir de uma biblioteca metagenômica construída a partir de DNA total de microbiota recuperada de reservatórios biodegradados de petróleo. A biblioteca consiste em 30.000 clones, dos quais 1000 representam exclusivamente bactérias anaeróbias e o restante é representante da microbiota aeróbia e anaeróbia (mista). Apenas 9.000 desses clones foram analisados em estudos prévios por ensabs de triagem de alto desempenho para a seleção da atividade biocatalítica, sendo que já foram encontradas 20 proteases e 2 lípases (biblioteca mista). Espera-se que, ao final dos processos de triagem enzimática, outras hidrolases sejam encontradas. Paralelamente a estas análises, uma epóxido hidrolase de Aspergillus niger (CCT1435) com atividade catalítica superior a de outros fungos também será caracterizada. Para tanto, essas hidrolases serão clonadas e expressas para posterior caracterização, purificação e resolução da estrutura tridimensional das mesmas. Com o conhecimento das estruturas protéicas pode-se ainda aplicar abordagens moleculares que alterem a conformação nativa destas proteínas tornando-as mais especificas e eficientes. (AU)

Publicações científicas
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
BELOTI, LILIAN L.; COSTA, BRUNA Z.; TOLEDO, MARCELO A. S.; SANTOS, CLELTON A.; CRUCELLO, ALINE; FAVARO, MARIANNA T. P.; SANTIAGO, ANDRE S.; MENDES, JULIANO S.; MARSAIOLI, ANITA J.; SOUZA, ANETE P. A novel and enantioselective epoxide hydrolase from Aspergillus brasiliensis CCT 1435: Purification and characterization. Protein Expression and Purification, v. 91, n. 2, p. 175-183, OCT 2013. Citações Web of Science: 10.
Publicações acadêmicas
(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

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