Análise molecular dos mecanismos de resistência a antibióticos em Pseudomonas aeruginosa e Acinetobacter spp.

• Processo: 07/04580-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2007
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2011
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Microbiologia - Microbiologia Aplicada
• Pesquisador responsável: Ana Lúcia da Costa Darini
• Beneficiário: Eduardo Carneiro Clímaco
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (FCFRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Pseudomonas aeruginosa Epidemiologia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Acinetobacter spp | Epidemiologia | Pseudomonas aeruginosa | Resistência a antibiótico | Bacteriologia Clínica

Resumo

P. aeruginosa e espécies de Acinetobacter são causas comuns de diversas infecções em pacientes hospitalizados, principalmente nos internados em centros de tratamento intensivo. Além disso, esses microrganismos se destacam por apresentarem resistência, intrínseca e adquirida, a várias classes de antibióticos, conferindo à bactéria fenótipos de multirresistência e panresistência. O presente projeto propõe estudar a participação de integrons (elementos genéticos que carreiam genes de resistência), da perda de porinas (canais protéicos da membrana externa), e da atividade de efluxo aumentada, como determinantes do fenótipo de multirresistência e panresistência. Serão estudadas bactérias isoladas de pacientes hospitalizados no Hospital Universitário da Universidade Federal de Juiz de Fora, no período de 2003 a 2006. O perfil de sensibilidade destas linhagens será determinado e utilizado para classificá-las em diferentes níveis de resistências. A variabilidade clonal das linhagens será investigada por PFGE. Hibridação com sondas de DNA será utiliza para detectar a presença de integrons de classe 1, 2 e 3. Os cassetes gênicos contidos nestes integrons serão pesquisados por PCR, RFLP e seqüenciamento. As proteínas de membrana externa serão extraídas e separadas por eletroforese, com o objetivo de se identificar linhagens com baixa expressão de porinas. Paralelamente, a detecção de linhagens com expressão aumentada de sistemas de efluxo será realizada pela avaliação do acúmulo intracelular de brometo de etídeo e por real time RT-PCR. Analisando os resultados das pesquisas de integrons, perda de porina e atividade de efluxo aumentada, juntamente com os dados dos perfis de resistência das linhagens e PFGE, podemos avaliar a participação destes mecanismos no contexto de multirresistência em P. aeruginosa e Acinetobacter spp.

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

CLÍMACO, Eduardo Carneiro. Análise molecular de mecanismos determinantes de resistência a antibióticos em Pseudomonas aeruginosa e Acinetobacter ssp.. 2011. Tese de Doutorado - Universidade de São Paulo (USP). Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (PCARP/BC) Ribeirão Preto.