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Engenharia de tecido ósseo: avaliações in vitro e in vivo do biomaterial híbrido fosfato de cálcio/ácido poli-láctico-co-glicólico e células osteoblásticas derivadas de células-tronco

Processo: 07/05757-1
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Mestrado
Vigência (Início): 01 de março de 2008
Vigência (Término): 28 de fevereiro de 2010
Área do conhecimento:Ciências da Saúde - Odontologia - Cirurgia Buco-maxilo-facial
Pesquisador responsável:Adalberto Luiz Rosa
Beneficiário:Luciana Gonçalves Sicchieri
Instituição-sede: Faculdade de Odontologia de Ribeirão Preto (FORP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
Assunto(s):Células-tronco   Osso e ossos   Biomateriais   Engenharia tecidual   Osteoblastos

Resumo

Recentemente, uma nova área de pesquisa vem desenvolvendo novas tecnologias como objetivo de otimizar o reparo ósseo, a engenharia de tecido ósseo. Tem sido sugerido queum reparo adequado do tecido ósseo pode ser obtido por biomateriais híbridos, produzidospela combinação de células osteoprogenitoras e materiais substitutos ósseos macroporosos.Os objetivos do presente projeto são investigar: (1) se o potencial osteogênico de células-troncomesenquimais derivadas de medula óssea de ratos é mantido quando estas são cultivadas sobre arcabouço constituído de fosfato de cálcio e ácido poliláctico-co-glicólico(CaP/PLGA); (2) se o estágio de diferenciação osteoblástica afeta a resposta tecidual in vivo ao biomaterial híbrido CaP/PLGA+células; (3) se as células expandidas e diferenciadas in vitro participam na resposta tecidual in vivo. Será avaliada em 0, 7 e 14 dias, por Real-time PCR, a expressão quantitativa de genes relacionados à osteogênese em células cultivadas sobre arcabouço CaP/PLGA e poliestireno. Amostras do biomaterial híbrido serão utilizadas para a preparação de cortes histológicos que serão processados para coloração com HE ou para localização de proteínas da matriz extracelular não-colágena, fosfatase alcalina e sialoproteína óssea, por imunofluorescência indireta. Será realizado experimento de implantação autógena, em defeitos produzidos em calvária de ratos, do biomaterial híbrido obtido pelo carreamento do arcabouço CaP/PLGA com células-tronco mesenquimaisindiferenciadas ou cultivadas por diferentes períodos (0, 7 e 14 dias). As amostras obtidas, ao final de 4 semanas de implantação, serão processadas para a preparação de corteshistológicos. Também será realizado um experimento de implantação com biomaterial híbrido produzido com células em estágio de diferenciação previamente selecionado no experimento anterior, marcadas com composto fluorescente. A marcação fluorescente permitirá rastrear as células transplantadas e avaliar a participação das mesmas no processo de neoformação óssea. As amostras obtidas, ao final de 1, 2 e 4 semanas de implantação, serão processadas como citado acima. Os dados serão submetidos ao teste não-paramétrico de Kruskal-Wallis seguido pelo teste de Fischer.

Publicações acadêmicas
(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)
SICCHIERI, Luciana Gonçalves. Engenharia de tecido ósseo: avaliações in vitro e in vivo do biomaterial híbrido ácido poli-láctico-co-glicólico/fosfato de cálcio e células osteoblásticas derivadas de células-tronco. 2010. Dissertação de Mestrado - Universidade de São Paulo (USP). Faculdade de Odontologia de Ribeirão Preto Ribeirão Preto.

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