Busca avançada
Ano de início
Entree

Caracterização funcional e estrutural do sistema tiorredoxina mitocondrial de Saccharomyces Cerevisiae

Processo: 07/06747-0
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Doutorado
Vigência (Início): 01 de fevereiro de 2008
Vigência (Término): 31 de janeiro de 2012
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Química de Macromoléculas
Pesquisador responsável:Luis Eduardo Soares Netto
Beneficiário:Eduardo Hiroshi Nakamatsu
Instituição-sede: Instituto de Biociências (IB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
Assunto(s):Mitocôndrias   Interação proteína-proteína   Estresse oxidativo   Proteínas

Resumo

O sistema tiorredoxina é amplamente distribuído nos diversos organismos, sendo responsável pela regulação de vários processos bioquímicos na célula. Composto pela tiorredoxina redutase, tiorredoxina e pelo NADPH esse sistema é capaz de reduzir dissulfetos em várias proteínas e, conjuntamente com o sistema glutationa, tem um importante papel na manutenção do ambiente redox celular. As tiorredoxinas (Trx) possuem um motivo conservado que contém uma cisteína reativa. Já as tiorredoxinas redutases (Trr) são compostas por dois domínios: um de interação com o NADPH (domínio NADPH) e outro que contém uma molécula de FAD coordenada (domínio FAD), sendo este último um de seus centros redox. O segundo centro redox de Trr é composto por duas cisteínas vicinais que reduzem dissulfetos da proteína alvo (como as Trx). Poucos estudos foram realizados sobre o sistema tiorredoxina mitocondrial de levedura. Este projeto tem como objetivo a caracterização da função biológica desse sistema através da determinação de alvos biológicos e do estudo estrutural de Trr2 e Trx3. Para isso, expressaremos em levedura proteínas com mutações em suas cisteínas de resolução, o que torna os complexos protéicos mais estáveis e possíveis de serem purificados e identificados. Também testaremos se estes complexos se formam em condições de crescimento específicas ou mediante estresse oxidativo. Realizaremos também ensaios de atividade determinando parâmetros enzimáticos de Trr2 frente a diferentes substratos para obtermos informações sobre a especificidade das interações dessa enzima com os mesmos. Através do alinhamento de seqüência primária e terciária desses substratos tentaremos correlacionar maior eficiência enzimática com aminoácidos específicos que podem ser cruciais para essas interações. Com isso, tentaremos correlacionar os dados de atividade frente a diferentes substratos (e novos alvos biológicos) com sua estrutura, o que pode resultar em importantes informações sobre sua possível função celular.

Publicações acadêmicas
(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)
NAKAMATSU, Eduardo Hiroshi. Caracterização funcional e estrutural do sistema Tiorredoxina mitocondrial de Saccharomyces cerevisiae. 2012. Tese de Doutorado - Universidade de São Paulo (USP). Instituto de Biociências São Paulo.

Por favor, reporte erros na lista de publicações científicas escrevendo para: cdi@fapesp.br.