Efeitos de organoteluranas no estresse oxidativo, na homeostase do cálcio intracelular e na expressão de enzimas antioxidantes: Estudos em células, mitocôndrias isoladas e modelos de membranas

• Processo: 08/00030-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2008
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2012
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Metabolismo e Bioenergética
• Pesquisador responsável: Iseli Lourenço Nantes Cardoso
• Beneficiário: Felipe Samuel Pessoto
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Mitocôndrias Estresse oxidativo
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Ant | Estresse oxidativo | microinjeção em células | Mitocôndrias | Rtpcr | Teluranas | Toxicologia de Teluranas

Resumo

Os estudos da literatura envolvendo organoteluranas revelam que estes compostos possuem eficientes propriedades antioxidantes, bem como a habilidade de reagir com grupos tiol de proteínas. Em trabalho prévio de nosso laboratório (Pessoto et al., Dissertação de Mestrado e Chem. Res. Toxicol., 2007, 20, 1453-1461) analisamos o efeito da concentração de organoteluranas, RT-03 e RT-04, em mitocôndrias de fígado de rato. Os efeitos nas mitocôndrias foram dependentes da concentração de telurana e variaram de proteção contra oxidação lipídica até abertura do poro de transição de permeabilidade mitocondrial (PTPM) de forma Ca2+ e ciclosporina A-dependente e -independente. Esses efeitos foram causados pela ação química, isto é reatividade com tiol de proteínas e por ação física, isto é, alteração da fluidez de membranas. Considerando que, não há consenso na Literatura quanto à especificidade das proteínas que compõem o PTPM, mas o o translocador ATP/ADP (ANT) é uma das proteínas postuladas como integrante do PTPM, pretendemos investigar a reatividade de teluranas com (ANT) isolado e incorporado em lipossomos e identificar, por meio de eletroforese bidimensional e espectrometria de massa, quais proteínas da membrana mitocondrial reagem com as teluranas. Por outro lado, devido a eficiente ação antioxidante, as teluranas não induziram o estresse oxidativo nos lipídeos de membrana e na matriz mitocondrial mesmo tendo depletado glutationa, por isso mostra-se interessante determinar se as teluranas afetam o tráfego de Ca2+ nas células por meio microinjeção das drogas e acompanhamento das alterações no Ca2+ celular por microscopia confocal e de fluorescência. Ainda com relação ao estresse oxidativo, é de grande interesse verificar se as teluranas afetam a expressão de enzimas antioxidantes tais como SOD, catalase e glutationa peroxidase. A expressão de enzimas antioxidantes será investigada por RT-PCR. Efetuaremos também estudos de EPR com spin trapping para determinar os mecanismos de reação das teluranas com biomoléculas