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Avaliação dos mecanismos básicos de ativação via receptores semelhantes ao Toll 4 (TLR-4) em monócitos de recém nascidos a termo e pré-termo

Processo: 09/52515-9
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Doutorado
Vigência (Início): 01 de janeiro de 2010
Vigência (Término): 31 de dezembro de 2013
Área do conhecimento:Ciências da Saúde - Medicina - Saúde Materno-infantil
Pesquisador responsável:Patricia Palmeira Daenekas Jorge
Beneficiário:Ana Lúcia Silveira Lessa
Instituição-sede: Faculdade de Medicina (FM). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
Assunto(s):Citocinas   Imunidade inata   Peptídeos e proteínas de sinalização intracelular

Resumo

A susceptibilidade do neonato à invasão de patógenos está relacionada, em parte, a imaturidade funcional da resposta imune. Uma ativação eficiente de linfócitos T neonatais requer a ativação de células apresentadoras de antígenos (APCs), como células dendríticas, monócitos ou macrófagos e linfócitos B, a qual envolverá a indução da expressão de moléculas co-estimulatórias, assim como a produção de diversas citosinas. O lipopolissacarídeo (LPS) de bactérias Gram-negativas, reconhecido pelo TLR4, que induz à ativação de diversas proteínas intracelulares e a translocação de diferentes fatores de transcrição que são essenciais para a expressão dos genes que mediam a resposta inflamatória. Recentes estudos sugerem que a imaturidade do sistema imune adaptativo ao nascimento envolve alterações funcionais das APCs. Desta forma, o objetivo deste trabalho consiste em avaliar a ativação e resposta de células mononucleares totais, monócitos e células dendríticas derivadas de monócitos (MDDCs) do sangue de cordão umbilical de recém-nascidos a termo e pré-termos saudáveis, bem como do sangue de suas respectivas mães, após a estimulação do TLR4 com LPS. Serão coletadas 15 amostras de sangue de cordão umbilical de recém-nascidos a termo; 15 amostras de sangue de cordão de recém-nascidos pré-termo com idade gestacional abaixo de 34 semanas e; 15 amostras de sangue de cordão de recém-nascidos pré-termo com idade gestacional entre 34 e 36 6/7 semanas, todos saudáveis com peso adequado para a idade gestacional. Os níveis séricos de citosinas pró-inflamatórias e antiinflamatórias e os níveis das populações leucocitárias no sangue de cordão umbilical serão avaliados por citometria de fluxo. A atividade funcional dos fagócitos será determinada pelo teste de avaliação da função fagocítica e atividade microbicida. A partir da cultura de células mononucleares, de monócitos e de MDDCs de sangue de cordão, estimulados via TLR-4 com LPS serão determinados os níveis de expressão protéica e gênica das citosinas pró-inflamatórias e antiinflamatórias e a expressão protéica de moléculas envolvidas na via de sinalização intracelular do TI R-4 (AU)

Publicações científicas (4)
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
SILVEIRA-LESSA, ANA LUCIA; QUINELLO, CAMILA; LIMA, LAILA; COSTA REDONDO, ANA CAROLINA; JURFEST RIVERO CECCON, MARIA ESTHER; CARNEIRO-SAMPAIO, MAGDA; PALMEIRA, PATRICIA. TLR expression, phagocytosis and oxidative burst in healthy and septic newborns in response to Gram-negative and Gram-positive rods. HUMAN IMMUNOLOGY, v. 77, n. 10, p. 972-980, OCT 2016. Citações Web of Science: 4.
QUINELLO, C.; SILVEIRA-LESSA, A. L.; CECCON, M. E. J. R.; CIANCIARULLO, M. A.; CARNEIRO-SAMPAIO, M.; PALMEIRA, P. Phenotypic Differences in Leucocyte Populations among Healthy Preterm and Full-Term Newborns. Scandinavian Journal of Immunology, v. 80, n. 1, p. 57-70, JUL 2014. Citações Web of Science: 12.
QUINELLO‚ C.; SILVEIRA-LESSA‚ AL; CIANCIARULLO‚ MA; REDONDO‚ ACC; CECCON‚ M.; CARNEIRO-SAMPAIO‚ M.; PALMEIRA‚ P. P025 Cytokine profile of healthy preterm and term cord blood and peripheral blood of septic newborns. CYTOKINE, v. 59, n. 3, p. 526, 2012.
SILVEIRA-LESSA‚ AL; QUINELLO‚ C.; CIANCIARULLO‚ MA; CECCON‚ M.; CARNEIRO-SAMPAIO‚ M.; PALMEIRA‚ P. P148 TLR-2 and TLR-4 mediated responses in monocytes from preterm and term newborns are distinct from those of adults. CYTOKINE, v. 59, n. 3, p. 567-568, 2012.

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