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Análise dos receptores de acetilcolina (nAChR) na musculatura esquelética de ratos com insuficiência cardíaca

Processo: 09/12760-4
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Mestrado
Vigência (Início): 01 de agosto de 2010
Vigência (Término): 31 de janeiro de 2012
Área do conhecimento:Ciências da Saúde - Medicina - Clínica Médica
Pesquisador responsável:Maeli Dal Pai
Beneficiário:Paula Aiello Tomé de Souza Castro
Instituição-sede: Instituto de Biociências (IBB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
Assunto(s):Receptores de acetilcolina   Junção neuromuscular   Insuficiência cardíaca

Resumo

A insuficiência cardíaca (IC) está associada à miopatia dos músculos esqueléticos com aumento da expressão das isoformas rápidas da cadeia pesada de miosina (MHC), alterações na matriz extracelular e na expressão dos fatores de regulação miogência (MRF). Os MRFs pertecem a uma família de fatores transcricionais que controlam a expressão de vários genes músculo-específicos. Eles formam heterodímeros com proteínas HLH e ligam-se a seqüências de DNA conhecidas como Ebox, presentes na região promotora de vários genes músculo-específicos, incluindo genes que codificam as subunidades dos receptores nicotínicos de acetilcolina (nAChR) da junção neuromuscular (JNM). Como na IC há uma alteração na expressão dos MRFs a hipótese do presente estudo é que, na IC, essa alteração pode afetar a expressão dos receptores de acetilcolina, podendo levar a alterações na morfologia da JNM. Neste estudo serão utilizados 20 ratos Wistar, machos, divididos em dois grupos: controle e experimental. A Insuficiência cardíaca (IC) será induzida pela injeção intra-peritoneal de monocrotalina. Quando os sintomas da IC estiverem presentes (~22 dias da injeção de monocrotalina), os animais serão sacrificados, o peso corporal e outros parâmetros relevantes serão então mensurados. Os músculos sóleo (SOL) e Extensor Digital Longo (EDL) serão dissecados em ambos os antímeros e utilizados para a avaliação da expressão gênica e protéica dos receptores de acetilcolina por PCR em tempo real e Western Blot, respectivamente. Também será avaliada a distribuição dos nAChRs e dos terminais nervosos através de imunomarcação e análise em microscopia confocal. Os dados obtidos serão submetidos à análise estatística apropriada.

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