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Avaliação da efetividade da terapia fotodinâmica antimicrobiana na inativação de Espécies de Candida e do dano celular causado a células epiteliais. avaliação in vitro e in vivo da cloro alumínio ftalocianina e outros derivados

Processo: 09/17975-9
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Doutorado
Vigência (Início): 01 de abril de 2010
Vigência (Término): 30 de junho de 2011
Área do conhecimento:Ciências da Saúde - Odontologia - Clínica Odontológica
Pesquisador responsável:Ana Cláudia Pavarina
Beneficiário:Ana Paula Dias Ribeiro
Instituição-sede: Faculdade de Odontologia (FOAr). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil
Assunto(s):Terapia fotodinâmica

Resumo

Este projeto de pesquisa contará com a realização de três estudos, nos quais será avaliado a cloro alumínio Ftalocianina e outros derivados associado à luz LED. No estudo I, duas cepas padrões C. albicans e C. glabrata, as quais serão estudadas em suspensão planquitônica e organizadas em biofilmes. Alíquotas das suspensões celulares serão transferidas para placas de 96 orifícios, tratadas com três concentrações da Ftalocianina (10; 25 e 50 mg/L) e expostas a três doses de luz (18; 25,5 e 37,5 J/cm2). Os biofilmes serão formados sobre a superfície de membranas de filtragem, nas quais alíquotas das suspensões dos microrganismos serão inoculadas. Após 48 horas, o conjunto será transferido para placas acrílicas de 24 compartimentos para que se inicie a PDT. Serão obtidas diluições seriadas de cada amostra (10-1 a 10-3), e alíquotas de 25 ¼L dessas diluições serão plaqueadas em SDA. No Estudo II, duas cepas padrões C. albicans e C. glabrata serão incubadas juntamente com cultura de queratinócitos. As co-culturas serão tratadas nas mesmas condições anteriores. Após a PDT, tantos os queratinócitos quanto as células fúngicas serão avaliadas quanto ao metabolismo celular pelo método de MTT, morfologia celular pela microscopia eletrônica de varredura, tipo de morte celular e níveis intracelulares de espécies reativas de oxigênio pela citometria de fluxo. No Estudo III, camundongos portadores de candidose induzida na língua serão submetidos à PDT. Após três dias da inoculação, os animais serão submetidos à PDT, tratados somente com FS, tratados somente com luz ou não receberão nenhum tratamento (n=5 cada grupo). Em seguida, será realizada recuperação de C. albicans da língua dos animais por meio da coleta com swabs, semeadura em SDA, incubação, e contagem de colônias viáveis. Além disso, será realizada análise macroscópica por fotografias e microscópica por histologia e avaliação de expressão gênica de citocinas anti e pró-inflamatórias pela técnica de PCR-RT. Os resultados serão analisados método estatístico apropriado.

Publicações científicas
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
SANITA, PAULA VOLPATO; PAVARINA, ANA CLAUDIA; DOVIGO, LIVIA NORDI; RIBEIRO, ANA PAULA DIAS; ANDRADE, MARIANA CARVALHO; DE OLIVEIRA MIMA, EWERTON GARCIA. Curcumin-mediated anti-microbial photodynamic therapy against Candida dubliniensis biofilms. Lasers in Medical Science, v. 33, n. 4, p. 709-717, MAY 2018. Citações Web of Science: 4.
DIAS RIBEIRO, ANA PAULA; ANDRADE, MARIANA CARVALHO; BAGNATO, VANDERLEI SALVADOR; VERGANI, CARLOS EDUARDO; PRIMO, FERNANDO LUCAS; TEDESCO, ANTNIO CLAUDIO; PAVARINA, ANA CLAUDIA. Antimicrobial photodynamic therapy against pathogenic bacterial suspensions and biofilms using chloro-aluminum phthalocyanine encapsulated in nanoemulsions. Lasers in Medical Science, v. 30, n. 2, p. 549-559, FEB 2015. Citações Web of Science: 18.
Publicações acadêmicas
(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)
RIBEIRO, Ana Paula Dias. Efeito da terapia fotodinâmica antimicrobiana sobre culturas planctônicas e biofilmes de bactérias e fungos utilizando curcumina e cloro-alumínio ftalocianina veiculada por nanoemulsões. 2012. 162 f. Tese de Doutorado - Universidade Estadual Paulista "Júlio de Mesquita Filho" Faculdade de Odontologia (Campus de Araraquara). Araraquara.

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