Vias de regulação da expressão gênica promíscua no timo envolve Aire e microRNAs

• Processo: 09/54694-8
• Linha de fomento: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Vigência (Início): 01 de junho de 2010
• Vigência (Término): 31 de outubro de 2013
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Imunologia - Imunogenética
• Pesquisador responsável: Geraldo Aleixo da Silva Passos Júnior
• Beneficiário: Ernna Hérida Domingues de Oliveira
• Instituição-sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 08/56594-8 - Controle do transcriptoma no diabetes mellitus, AP.TEM
• Assunto(s): Análise de sequência com séries de oligonucleotídeos Interferência de RNA Timo

Resumo

O projeto atual refere-se ao estudo comparativo da expressão gênica promíscua em células do epitélio do timo (TECs) de camundongos isogênicos de uma linhagem não auto-imune (BALB-C) e da linhagem NOD, non obese diabetic (que desenvolve diabetes mellitus do tipo 1). O objetivo central é o de traçarmos assinaturas de expressão gênica diferencial de células epiteliais tímicas de cada uma destas duas linhagens isogênicas e com o uso de programas de bioinformática aplicados a análise de dados de microarrays (Cluster - Tree View e Significance Analysis of Microarrays, SAM), apontarmos genes de TSAs que uma vez modulados no timo (indução ou repressão) poderão influenciar o surgimento da auto-impunidade. Supõe-se que o controle genético molecular da expressão promíscua de TSAs no timo é exercido pelo controlador transcricional Aire (autoimmune regulator), mas ainda faltam evidencias diretas da co-regulação de Aire e a expressão de TSAs. Neste projeto, pretendemos estudar esta co-regulação fazendo uso da técnica de RNA de interferência (RNAí) silenciando o transcrito do gene Aire diretamente no timo in vivo e observando a expressão de genes de TSAs por meio dos microarrays. Faremos uso da técnica de eletroporação e/ou da lipofecção (uso de lipossomos) in vivo para transfectar o RNAi anti gene Aire diretamente no timo de camundongos intactos. Experimentos preliminares de nosso laboratório mostraram que a transfecção do timo in vivo com RNAi, usando essas técnicas, é eficiente para o estroma tímico. Os resultados serão importantes para avaliarmos se a perturbação do transcrito do gene Aire no timo de uma linhagem normal (BALB-C) tem conseqüências sobre genes de TSAs comparáveis com a linhagem NOD (non obese diabetic) que é autoimune. (AU)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

OLIVEIRA, Ernna Hérida Domingues de. Vias de regulação da expressão gênica promíscua no timo envolve Aire e microRNAs. 2013. Tese de Doutorado - Universidade de São Paulo (USP). Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto Ribeirão Preto.