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Influência da expressão da alfa-6 integrina na produção de SSC murinas transgênicas por lipofecção

Processo: 10/04534-1
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Mestrado
Vigência (Início): 01 de agosto de 2010
Vigência (Término): 31 de julho de 2012
Área do conhecimento:Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
Pesquisador responsável:José Antonio Visintin
Beneficiário:Robinson André Worst
Instituição-sede: Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
Assunto(s):Transgenia

Resumo

Ao longo da vida reprodutiva dos machos adultos, espermatozóides são formados pelas células-tronco espermatogoniais (SSC, do inglês spermatogonial stem cells) por um processo conhecido como espermatogênese. Desde o momento em que células-tronco germinativas puderam ser manipuladas in vitro e produzir nascimentos, os recentes avanços das técnicas de cultivo abriram novas possibilidades para a transgenia da linha germinativa. As pesquisas atualmente desenvolvidas fazem uso das SSC, pois são um excelente modelo para compreender melhor a biologia das células-tronco adultas e os mecanismos que controlam as funções das SSC. Este projeto de pesquisa pretende estabelecer o cultivo e a modificação de SSC murinas para produção de animais transgênicos. As SSC murinas serão isoladas de testículos de camundongos com 5 a 10 dias de idade da linhagem C57Bl6, cultivadas in vitro, caracterizadas quanto sua morfologia, grau de diferenciação e expressão de alfa-6 integrina, a qual permitirá a purificação das SSC por triagem celular por fluorescência ativada. As SSC serão geneticamente modificadas com a inserção do gene GFP pela técnica de lipofecção e transplantadas em testículo de camundongos receptores. A verificação da integração será feita através de avaliações histológicas e constatação da fluorescência das SSC GFP+ transplantadas.

Publicações acadêmicas
(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)
WORST, Robinson André. Influência da expressão da alfa-6 integrina na produção de células-tronco espermatogoniais murinas transgênicas. 2012. Dissertação de Mestrado - Universidade de São Paulo (USP). Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia São Paulo.

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