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Modulação das atividades farmacológicas, bioquímicas e enzimáticas das sPLA2 básicas de Bothrops Jararacussu e Crotalus durissus ssp por extratos semi purificados obtidos a partir de Tithonia diversifolia

Processo: 10/09988-0
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Doutorado
Vigência (Início): 01 de setembro de 2010
Vigência (Término): 31 de outubro de 2012
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Farmacologia - Etnofarmacologia
Pesquisador responsável:Marcos Hikari Toyama
Beneficiário:Veronica Cristina Gomes Soares
Instituição-sede: Instituto de Biologia (IB). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
Assunto(s):Bioquímica   Bothrops   Crotalus   Edema

Resumo

O objetivo deste projeto é avaliar o efeito inibitório, de extratos obtidos a partir das partes aéreas de Tithonia diversifolia, sobre a atividade do veneno total e frações de sPLA2 básicas obtidos de Bothrops jararacussu e Crotalus durissus ssp. Além dos ensaios em enzimas isoladas das peçonhas de Crotalus durissus ssp bem como de Bothrops jararacussu, serão realizados testes sobre a atividade enzimática fosfolipásica de sPLA2 obtidas a partir de pâncreas bovino e sPLA2 intracelulares. Para a determinação da possível atividade antifosfolipásica A2 destes extratos, as sPLA2 básicas serão previamente incubadas com os extratos, em seguida, submetidas a ensaios de: edema de pata, edema de pele, miotoxicidade, neurotoxicidade e agregação plaquetária. O efeito antiveneno, será determinado após a pré incubação do veneno total com os extratos, em diferentes concentrações, e a realização dos mesmos ensaios mencionados para as sPLA2 básicas. A atividade anti hemorrágica e os efeitos destes compostos sobre o tempo de coagulação plasmática e a degradação do fibrinogênio induzidos pelo veneno total também serão avaliados. A atividade dos extratos será avaliada por ensaios enzimáticos, bem como será objetivo desse projeto determinar o efeito citotóxico, dos mesmos, sobre linhagem celular contínua de fibroblastos.Os efeitos desses extratos sobre a estrutura das sPLA2 básicas serão avaliados, por técnicas espectroscópicas de dicroísmo circular, fluorescência UV-Vis e varredura. As técnicas de cromatografia de HPLC e de exclusão molecular serão empregadas para verificar eventuais mudanças no estado de oligomerização das sPLA2 básicas. A técnica de HPLC de fase reversa, permitirá verificar possíveis alterações na hidrofobicidade das sPLA2 básicas. A complementação, da relação estrutura química atividade dos principais constituintes dos extratos, será realizada através de outros protocolos específicos para análise de aminoácidos, técnicas essas empregadas para a caracterização das modificações estruturais das sPLA2 básicas pelos extratos de Tithonia diversifolia.

Publicações acadêmicas
(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

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