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Otimização de reação em cadeia da polimerase direta (PCRD) com sangue total: aplicação na detecção de Ehrlichia canis.

Processo: 10/15769-0
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
Vigência (Início): 01 de dezembro de 2010
Vigência (Término): 30 de novembro de 2011
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
Pesquisador responsável:Mozart de Azevedo Marins
Beneficiário:Mariana Brum Lopes
Instituição-sede: Universidade de Ribeirão Preto (UNAERP). Campus Ribeirão Preto. Ribeirão Preto , SP, Brasil
Assunto(s):Ehrlichia canis

Resumo

A E. canis, agente etiológico da erliquiose monocítica canina (EMC), é uma das principais espécies de bactérias hemoparasitas a infectar cães. As técnicas de análise de DNA têm sido apontadas como uma ferramenta importante para auxiliar o diagnóstico da EMC, especialmente no estágio agudo da doença. Entretanto, o desenvolvimento de testes diagnósticos moleculares dependem da facilidade de execução dos ensaios, custos, qualidade e facilidade de visualização dos resultados. Os objetivos deste projeto de IC integram um projeto maior que visa a otimização de ensaios de PCR convencional, PCR quantitativo e técnicas de amplificação isotérmica de DNA, como a LAMP, para a detecção de hemoparasitas em animais de criação e companhia. Dois pontos principais serão enfocados, a otimização das reações para utilização de sangue diretamente, sem a purificação prévia de DNA, e o desenvolvimento de uma formulação liofilizada para os reagentes utilizados nas reações. Neste projeto de IC serão realizados experimentos para estabelecer a formulação do tampão a ser utilizado em reações de PCR convencional e a avaliação da eficiência das reações para a detecção da bactéria E. canis.