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Caracterização funcional: a cinase humana Nek5 interfere negativamente na morte celular e no processo de poliglutamilação

Processo: 10/16831-0
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Doutorado
Vigência (Início): 01 de março de 2011
Vigência (Término): 28 de fevereiro de 2015
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
Pesquisador responsável:Jörg Kobarg
Beneficiário:Talita Diniz Melo Hanchuk
Instituição-sede: Centro Nacional de Pesquisa em Energia e Materiais (CNPEM). Ministério da Ciência, Tecnologia, Inovações e Comunicações (Brasil). Campinas , SP, Brasil
Assunto(s):Neoplasias   Ciclo celular

Resumo

As proteínas cinases Nek (NIMA related kinases) constituem uma família altamente conservada de proteínas envolvidas na progressão do ciclo celular. Em humanos foram identificadas 11 Neks (1-11), sendo que para algumas a estrutura já foi determinada, bem como a relevância fisiopatológica. Várias proteínas da família das Neks são produtos de genes relativos a patologias relacionadas a defeitos na progressão do ciclo celular e no mecanismo de reparo de DNA durante a interfase, sobretudo em diferentes cânceres. A proteína Nek5 foi identificada, de acordo com sua sequência genômica em organismos como Homo sapiens, Mus musculus, Bos taurus, dentre outros. Entretanto, características inerentes a proteína permanecem pouco elucidadas, como por exemplo sua função, estrutura e interações. Portanto, o objetivo geral deste projeto é a clonagem, expressão e purificação de Nek5 para ensaios biofísicos e de cristalização, visando análises estruturais. Em paralelo, serão realizados: 1) estudos funcionais envolvendo silenciamento por RNA (iRNA) e superexpressão de Nek5 em células humanas; 2) identificação por espectrometria de massas de proteínas que interagem com Nek5 através de 'pull down' e ensaio de duplo híbrido; e 3) ensaios de deslocamento térmico baseado em fluorescência e outros ensaios in vitro a fim de verificas alvos para inibição de atividade de Nek5.

Publicações científicas
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
MELO-HANCHUK, TALITA DINIZ; SLEPICKA, PRISCILA FERREIRA; PELEGRINI, ALESSANDRA LUIZA; MARTINS MENCK, CARLOS FREDERICO; KOBARG, JORG. NEK5 interacts with topoisomerase II beta and is involved in the DNA damage response induced by etoposide. Journal of Cellular Biochemistry, v. 120, n. 10, p. 16853-16866, OCT 2019. Citações Web of Science: 0.
MELO HANCHUK, TALITA D.; PAPA, PRISCILA FERREIRA; LA GUARDIA, PAOLO G.; VERCESI, ANIBAL E.; KOBARG, JOERG. Nek5 interacts with mitochondrial proteins and interferes negatively in mitochondrial mediated cell death and respiration. CELLULAR SIGNALLING, v. 27, n. 6, p. 1168-1177, JUN 2015. Citações Web of Science: 8.
Publicações acadêmicas
(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

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