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Efeito da trombina sobre a produção de proteínas da matrix e TNF-alfa por células-tronco mesenquimais originadas da medula óssea de cão

Processo: 10/18683-9
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
Vigência (Início): 01 de fevereiro de 2011
Vigência (Término): 31 de dezembro de 2011
Área do conhecimento:Ciências da Saúde - Odontologia
Pesquisador responsável:Sandra Helena Penha de Oliveira
Beneficiário:Rafael Simões Gonçalves
Instituição-sede: Faculdade de Odontologia (FOA). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araçatuba. Araçatuba , SP, Brasil
Assunto(s):Trombina   Citocinas   Cultura de células   Engenharia tecidual   Inflamação

Resumo

Este trabalho tem como objetivo avaliar, in vitro, o papel da trombina sobre aproliferação e expressão de Colágeno tipo I e III, fibronectina e laminina por célulastroncomesenquimais originárias da medula óssea de cães. As células-tronco serãoobtidas de cães adultos jovens, sem raça definida, com idade aproximada de 1 ano,sendo que o material da medula óssea será obtido por aspiração na região da cristado osso ilíaco dos cães. As células-tronco mesenquimais serão separadas pelométodo de purificação utilizando-se Ficoll-PaqueTM Plus. Posteriormente as célulasserão cultivadas em meio de cultura Dulbecco´s modificado por Eagle (D-MEM) paraa proliferação das células. Após a terceira passagem, as células serão plaqueadas eestimuladas com trombina nas concentrações de 5, 10 e 50 U/mL e a expressão doRNA mensageiro para Colágeno tipo I, colágeno tipo III, fibronectina e TGF-beta e aprodução de TNF-± serão avaliadas por RT-PCR em tempo real e ELISA. Seráutilizado teste t de student (ANOVA) com correção de Bonferroni para determinar asignificância da diferença entre os grupos do mesmo ensaio.