Caracterização proteômica comparativa da agregação plaquetária induzida pela trombina e pela PA-BJ, uma serinoproteinase do veneno da Bothrops jararaca.

• Processo: 10/17328-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2011
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2015
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Solange Maria de Toledo Serrano
• Beneficiário: Ana Karina de Oliveira
• Instituição Sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 98/14307-9 - Center for Applied Toxinology, AP.CEPID
• Assunto(s): Espectrometria de massas Eletroforese em gel bidimensional Trombina Fosforilação Agregação plaquetária
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: agregacao plaquetaria | eletroforese bidimensional | Espectrometria de massas | fosforilação | Serinoproteinase de veneno de serpente | trombina | Proteômica; espectrometria de massas; agregação plaquetária

Resumo

A PA-BJ é um serinoproteinase do veneno da Bothrops jararaca que induz agregação plaquetária em plasma rico em plaquetas e em suspensões de plaquetas lavadas. O efeito da PA-BJ em plaquetas é mediado pelos receptores de trombina PAR1 e PAR4, que são receptores plaquetários acoplados à proteína G. A PA-BJ cliva in vitro o exodomínio recombinante do receptor PAR1 nas ligações Arg41-Ser42 e Arg46-Asn47, resultando na inativação do "tethered ligand". Ainda, a PA-BJ promove a liberação de cálcio em fibroblastos transfectados com o receptor PAR4 e tornam estas células insensíveis à ação da trombina. Sua seqüência de aminoácidos foi determinada por técnicas de química de proteínas e apresenta um sítio de N-glicosilação e um de O-glicosilação. Já foram identificadas pelo menos oito isoformas de PA-BJ com diferenças de massa molecular e ponto isoelétrico e provavelmente diferenças entre seus resíduos de aminoácidos e diferentes graus de glicosilação. Com o objetivo de entender melhor os eventos de sinalização causados pela clivagem do receptor PAR1 pela PA-BJ, pretendemos neste projeto utilizar algumas abordagens proteômicas e fosfoproteômicas para analisar o proteoma de plaquetas ativadas pela PA-BJ e pela trombina. Este estudo deverá resultar na geração de novos conhecimentos sobre a interação de serinoproteinases com seus substratos macromoleculares e a descrição de novas vias de sinalização celular em plaquetas.

Publicações científicas

(6)

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

ZELANIS, ANDRE; OLIVEIRA, ANA K.; PRUDOVA, ANNA; HUESGEN, PITTER F.; TASHIMA, ALEXANDRE K.; KIZHAKKEDATHU, JAYACHANDRAN; OVERALL, CHRISTOPHER M.; SERRANO, SOLANGE M. T.. Deep Profiling of the Cleavage Specificity and Human Substrates of Snake Venom Metalloprotease HF3 by Proteomic Identification of Cleavage Site Specificity (PICS) Using Proteome Derived Peptide Libraries and Terminal Amine Isotopic Labeling of Substrates (TAILS) N-Terminomics. JOURNAL OF PROTEOME RESEARCH, v. 18, n. 9, p. 3419-3428, SEP 2019. (13/07467-1, 11/23403-8, 11/08514-8, 10/17328-0)

ASEGA, AMANDA F. .; MENEZES, MILENE C.; TREVISAN-SILVA, DILZA; CAJADO-CARVALHO, DANIELA; BERTHOLIM, LUCIANA; OLIVEIRA, ANA K.; ZELANIS, ANDRE; SERRANO, SOLANGE M. T.. Cleavage of proteoglycans, plasma proteins and the platelet-derived growth factor receptor in the hemorrhagic process induced by snake venom metalloproteinases. SCIENTIFIC REPORTS, v. 10, n. 1, JUL 31 2020. (17/00715-0, 10/00206-0, 17/19252-0, 10/17328-0, 11/08514-8, 13/07467-1)

SERRANO, SOLANGE M. T.; OLIVEIRA, ANA K.; MENEZES, MILENE C.; ZELANIS, ANDRE. The proteinase-rich proteome of Bothrops jararaca venom. Toxin Reviews, v. 33, n. 4, p. 169-184, DEC 2014. (13/07467-1, 10/17328-0)

ZELANIS, ANDRE; HUESGEN, PITTER F.; OLIVEIRA, ANA KARINA; TASHIMA, ALEXANDRE K.; SERRANO, SOLANGE M. T.; OVERALL, CHRISTOPHER M.. Snake venom serine proteinases specificity mapping by proteomic identification of cleavage sites. JOURNAL OF PROTEOMICS, v. 113, p. 260-267, JAN 15 2015. (13/07467-1, 10/17328-0, 11/23403-8, 11/08514-8)

ASEGA, AMANDA F.; OLIVEIRA, ANA K.; MENEZES, MILENE C.; NEVES-FERREIRA, ANA GISELE C.; SERRANO, SOLANGE M. T.. Interaction of Bothrops jararaca venom metalloproteinases with protein inhibitors. Toxicon, v. 80, p. 1-8, MAR 15 2014. (98/14307-9, 10/17328-0, 10/00206-0)

ASEGA, AMANDA F.; BARROS, BIANCA C. S. C.; CHAVES, ALISON F. A.; OLIVEIRA, ANA K.; BERTHOLIM, LUCIANA; KITANO, EDUARDO S.; SERRANO, SOLANGE M. T.. Mouse skin peptidomic analysis of the hemorrhage induced by a snake venom metalloprotease. Amino Acids, v. 55, n. 9, p. 17-pg., 2023-06-30. (21/10570-5, 13/07467-1, 20/12317-2, 10/17328-0, 11/11308-0, 11/16623-1, 10/00206-0)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

OLIVEIRA, Ana Karina de. Caracterização proteômica comparativa da agregação plaquetária induzida pela trombina e pela PA-BJ, uma serinoproteinase do veneno da Bothrops jararaca. 2015. Tese de Doutorado - Universidade de São Paulo (USP). Conjunto das Químicas (IQ e FCF) (CQ/DBDCQ) São Paulo.