Caracterização cinética e bioquímica de lipase de Trichoderma sp purificada por micelas reversas

• Processo: 10/18546-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Vigência (Início): 01 de janeiro de 2011
• Vigência (Término): 31 de dezembro de 2011
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Enzimologia
• Pesquisador responsável: Valéria Marta Gomes de Lima
• Beneficiário: Rafaela Mortean Filippi
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências e Letras (FCL-ASSIS). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Assis. Assis , SP, Brasil
• Assunto(s): Micelas reversas Lipase Extração líquido-líquido Trichoderma Cinética
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: lipases | micelas reversas | Enzimologia Aplicada à Biotecnologia Industrial

Resumo

As lipases são enzimas do grupo serina hidrolases (E.C. 3.1.1.3) que possuem como substrato natural os triacilgliceróis de cadeia longa. Elas catalisam reações de hidrólise de óleos e gorduras liberando ácidos graxos livres e glicerol. Podem também atuar em reações reversas, tais como esterificação e transestrificação (interesterificação, alcoólises e acidólises). Devido ao seu alto grau de seletividade, à alta eficiência em condições de baixas temperaturas, à versatilidade de suas propriedades aplicadas, a sua facilidade de obtenção e produção e a sua estabilidade em solventes orgânicos, elas podem ser amplamente utilizadas em processos industriais, como por exemplo, na produção do biodiesel, na hidrólise de óleos e gorduras, na indústria de detergentes, cosméticos, fármacos e alimentos, no tratamento de resíduos, entre outros. Estas enzimas podem ser obtidas a partir de plantas, bactérias e fungos. Dentre as lipases fúngicas, está a lipase obtida do fungo filamentoso Trichoderma sp. Sua obtenção se dá pela fermentação submersa contendo como substrato principal o óleo de oliva. Para a obtenção do extrato bruto utiliza-se a precipitação com sulfato de amônio. Já para a obtenção do extrato purificado, é realizado o sistema de micelas reversas, técnica de purificação por extração líquido-líquido, a qual permite separar o material celular e simultaneamente concentrar a proteína de interesse. É uma técnica com grau de dificuldade menor e com custo reduzido, em relação às técnicas cromatográficas tradicionais. O objetivo deste trabalho é fazer a caracterização da lipase de Trichoderma sp purificada por micelas reversas, a qual pode fazer um direcionamento para as possíveis aplicações industriais. A caracterização cinética e bioquímica será realizada através do estudo de propriedades como: efeito de diferentes substratos na atividade lipolítica, determinação de constantes cinéticas, efeito de íons metálicos, quelantes e surfactantes na atividade lipolítica, estabilidade da lipase em diferentes solventes orgânicos, efeito de pH e temperatura na atividade e estabilidade da enzima. (AU)