Caracterização de Domínios de Membranas Eritrocitárias obtidos com ou sem uso de Detergente

• Processo: 10/18516-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2011
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2013
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica
• Pesquisador responsável: Eneida de Paula
• Beneficiário: Cleyton Crepaldi Domingues
• Instituição Sede: Instituto de Biologia (IB). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Bolsa(s) vinculada(s): 12/14737-2 - Papel da hipercolesterolemia na modificação da composição de microdomínios - lipid rafts - em câncer de próstata, BE.EP.PD
• Assunto(s): Eritrócitos Solubilização Biomembranas Detergentes
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: biomembranas | detergentes | detergent-resistant membranes | domínios lipídios | Eritrócitos | Solubilizacao | Biomembranas

Resumo

A formação de domínios na fase líquido-ordenada (lipid rafts), ricos em colesterol e esfingolipídios onde proteínas específicas se inserem para manter sua funcionalidade, é um fenômeno das biomembranas. Esses domínios coexistem com a fase líquido-desordenada das membranas e operacionalmente têm sido estudados através do preparo de DRMs (Detergent-Resistant Membranes). A membrana do eritrócito é um ótimo modelo para o estudo dos lipid rafts. Nosso grupo de pesquisa (Biomembranas, IB/Unicamp) tem se dedicado ao estudo da interação de moléculas anfifílicas com membranas modelo e biológicas usando abordagens metodológicas que permitem detectar alterações nas propriedades estruturais e dinâmicas dessas membranas. Recentemente, demonstramos pela primeira vez na literatura, o preparo e a caracterização de DRMs de eritrócitos obtidas com uso do detergente C12E8 (Crepaldi Domingues et al., 2009), além da caracterização de DRMs de eritrócitos obtidos a 37°C (Domingues et al., 2010) para Triton X-100. A fase líquido-ordenada foi determinada nessas DRMs pela técnica do marcador de spin (por Ressonância Paramagnética Eletrônica) e o aumento da concentração de colesterol e a presença de proteínas marcadoras de lipid rafts foram determinados.Uma vez que detergentes podem induzir a formação de domínios de membrana, nesse projeto pretendemos investigar a composição lipídica e protéica de domínios da membrana eritrocitária, obtidos sem o uso de detergentes, e compará-los com DRMs. Além disso, pretendemos ampliar a caracterização lipídica dessas estruturas, quantificando o conteúdo de esfingomielina e glicoesfingolipídios, além de colesterol. Finalmente, temos também por objetivo determinar a possível interação molecular entre anestésicos locais e componentes dos domínios da membrana, procurando relacioná-los a organização/estruturação desses domínios.

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

CASADEI, BRUNA RENATA; CARVALHO, PATRICIA DE OLIVEIRA; RISKE, KARIN A.; BARBOSA, RAQUEL DE MELO; DE PAULA, ENEIDA; DOMINGUES, CLEYTON CREPALDI. Brij detergents reveal new aspects of membrane microdomain in erythrocytes. MOLECULAR MEMBRANE BIOLOGY, v. 31, n. 6, p. 195-205, SEP 2014. (10/18516-5, 09/00904-1)

CASADEI, BRUNA R.; DOMINGUES, CLEYTON C.; DE PAULA, ENEIDA; RISKE, KARIN A.. Direct Visualization of the Action of Triton X-100 on Giant Vesicles of Erythrocyte Membrane Lipids. BIOPHYSICAL JOURNAL, v. 106, n. 11, p. 2417-2425, JUN 3 2014. (10/18516-5, 12/10442-8)