| Processo: | 11/50051-5 |
| Modalidade de apoio: | Bolsas no Brasil - Doutorado |
| Data de Início da vigência: | 01 de abril de 2011 |
| Data de Término da vigência: | 31 de dezembro de 2012 |
| Área de conhecimento: | Ciências da Saúde - Odontologia - Endodontia |
| Pesquisador responsável: | Brenda Paula Figueiredo de Almeida Gomes |
| Beneficiário: | Marcos Sergio Endo |
| Instituição Sede: | Faculdade de Odontologia de Piracicaba (FOP). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Piracicaba , SP, Brasil |
| Assunto(s): | Reação em cadeia por polimerase (PCR) Micro-organismos |
| Palavra(s)-Chave do Pesquisador: | Cultura Microbiana | E Test | Endodontia | Insucesso Endodontico | Microrganismos | Pcr |
Resumo Os objetivos do presente estudo serão: a) Identificar bactérias do gênero Enterococcus spp. no canal radicular de dentes com insucesso endodôntico e lesão periapical através do método de cultura microbiana. b) Detectar através do método de PCR espécie-específico. c) Detectar através do método de Nested PCR Enterococcus faecalis. d) Quantificar cepas viáveis e endotoxinas do canal radicular antes e após o preparo químico-mecânico (PQM). e) Correlacionar microrganismos detectados e níveis de endotoxinas com aspectos clínicos e radiográficos. f) Avaliar a suscetibilidade antimicrobiana de cepas clínicas de Enterococcus faecalis. g) analisar os fatores de virulência de E. Faecalis isoladas utilizando PCR para detecção da presença dos genes esp, gel/E, ace, asa, asa373, efaA. Serão realizadas coletas antes e após PQM de 15 canais radiculares de dentes com insucesso endodôntico, assintomáticos e presença de lesão periapical. As amostras serão diluídas, taqueadas e incubadas. Após o período de incubação as colônias serão caracterizadas com o objetivo de verificar a presença do gênero Enterococcus spp. pelo método bioquímico. Espécies de bactérias Gram-positivas e Gram-negativas serão investigadas através do método de PCR espécie-específico. Para a espécie E. Faecalis também será utilizado Nested PCR, Níveis de endotoxinas serão quantificados no canal radicular através do teste turbidiméírico (Pyrogent 5000 LAL), investigando sua relação com os aspectos clínicos e radiográficos. As cepas clínicas de E faecalis isoladas serão testadas quanto à suscetibilidade antimicrobiana através do método do E-test. Reações de PCR também serão utilizadas para investigar determinantes virulentos nestas cepas de E. faecalis. Nesse caso, o DNA será isolado das cepas cultivadas, e serão utilizados primeiros específicos para detectar: substância de agregação (asa e asa373), adesinas de superfície ou fator de aderência (ace e esp), ativador de citolosina (cylA) e gelatinase (gelE). (AU) | |
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