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Avaliacao in vivo do efeito do preparo quimico-mecanico sobre microrganismos e endotoxinas em infeccoes endodonticas persistentes e suscetibilidade antimicrobiana dos enterococcus spp. isolados.

Processo: 11/50051-5
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Doutorado
Vigência (Início): 01 de abril de 2011
Vigência (Término): 31 de dezembro de 2012
Área do conhecimento:Ciências da Saúde - Odontologia - Endodontia
Pesquisador responsável:Brenda Paula Figueiredo de Almeida Gomes
Beneficiário:Marcos Sergio Endo
Instituição-sede: Faculdade de Odontologia de Piracicaba (FOP). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Piracicaba , SP, Brasil
Assunto(s):Reação em cadeia por polimerase (PCR)   Micro-organismos

Resumo

Os objetivos do presente estudo serão: a) Identificar bactérias do gênero Enterococcus spp. no canal radicular de dentes com insucesso endodôntico e lesão periapical através do método de cultura microbiana. b) Detectar através do método de PCR espécie-específico. c) Detectar através do método de Nested PCR Enterococcus faecalis. d) Quantificar cepas viáveis e endotoxinas do canal radicular antes e após o preparo químico-mecânico (PQM). e) Correlacionar microrganismos detectados e níveis de endotoxinas com aspectos clínicos e radiográficos. f) Avaliar a suscetibilidade antimicrobiana de cepas clínicas de Enterococcus faecalis. g) analisar os fatores de virulência de E. Faecalis isoladas utilizando PCR para detecção da presença dos genes esp, gel/E, ace, asa, asa373, efaA. Serão realizadas coletas antes e após PQM de 15 canais radiculares de dentes com insucesso endodôntico, assintomáticos e presença de lesão periapical. As amostras serão diluídas, taqueadas e incubadas. Após o período de incubação as colônias serão caracterizadas com o objetivo de verificar a presença do gênero Enterococcus spp. pelo método bioquímico. Espécies de bactérias Gram-positivas e Gram-negativas serão investigadas através do método de PCR espécie-específico. Para a espécie E. Faecalis também será utilizado Nested PCR, Níveis de endotoxinas serão quantificados no canal radicular através do teste turbidiméírico (Pyrogent 5000 LAL), investigando sua relação com os aspectos clínicos e radiográficos. As cepas clínicas de E faecalis isoladas serão testadas quanto à suscetibilidade antimicrobiana através do método do E-test. Reações de PCR também serão utilizadas para investigar determinantes virulentos nestas cepas de E. faecalis. Nesse caso, o DNA será isolado das cepas cultivadas, e serão utilizados primeiros específicos para detectar: substância de agregação (asa e asa373), adesinas de superfície ou fator de aderência (ace e esp), ativador de citolosina (cylA) e gelatinase (gelE). (AU)

Publicações científicas (4)
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
FREDERICO C. MARTINHO; FÁBIO R. M. LEITE; LETÍCIA M.M. NÓBREGA; MARCOS S. ENDO; GUSTAVO G. NASCIMENTO; RICHARD P. DARVEAU; BRENDA P. F. A. GOMES. Comparison of Fusobacterium nucleatum and Porphyromonas gingivalis Lipopolysaccharides Clinically Isolated from Root Canal Infection in the Induction of Pro-Inflammatory Cytokines Secretion. Brazilian Dental Journal, v. 27, n. 2, p. 202-207, Abr. 2016.
ENDO, MARCOS SERGIO; CORREA SIGNORETTI, FERNANDA GRAZIELA; KITAYAMA, VIVIAN SAYURI; SALUSTIANO MARINHO, ARIANE CASSIA; MARTINHO, FREDERICO CANATO; DE ALMEIDA GOMES, BRENDA PAULA F. Investigation in vivo of Enterococcus faecalis in endodontic retreatment by phenotypic and genotypic methods. ACTA SCIENTIARUM-HEALTH SCIENCES, v. 37, n. 1, p. 95-103, JAN-JUN 2015. Citações Web of Science: 3.
ENDO, M. S.; MARTINHO, F. C.; ZAIA, A. A.; FERRAZ, C. C. R.; ALMEIDA, J. F. A.; GOMES, B. P. F. A. Quantification of cultivable bacteria and endotoxin in post-treatment apical periodontitis before and after chemo-mechanical preparation. EUROPEAN JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY & INFECTIOUS DISEASES, v. 31, n. 10, p. 2575-2583, OCT 2012. Citações Web of Science: 14.
GOMES, BRENDA P. F. A.; ENDO, MARCOS S.; MARTINHO, FREDERICO C. Comparison of Endotoxin Levels Found in Primary and Secondary Endodontic Infections. JOURNAL OF ENDODONTICS, v. 38, n. 8, p. 1082-1086, AUG 2012. Citações Web of Science: 27.
Publicações acadêmicas
(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)
ENDO, Marcos Sergio. Investigação de microrganismos e endotoxinas em infecções intrarradiculares associadas ao insucesso do tratamento endodôntico antes e após o preparo químico-mecânico. 2012. Tese de Doutorado - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Odontologia de Piracicaba.

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