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Expressão da proteína rgs-CaM em Escherichia coli visando a realização de ensaios de interação proteica

Processo: 11/01144-0
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
Vigência (Início): 01 de abril de 2011
Vigência (Término): 31 de dezembro de 2012
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Genética - Genética Vegetal
Pesquisador responsável:Ivan de Godoy Maia
Beneficiário:Bruno Spinetti Moda
Instituição-sede: Instituto de Biociências (IBB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
Assunto(s):Biologia molecular

Resumo

O silenciamento por RNA é um mecanismo conservado de resposta a moléculas de RNA dupla fita (dsRNA) presente em todos eucariontes, que desempenha papéis fundamentais na regulação da expressão gênica, na resistência a vírus e no controle da transposição de elementos móveis. Sabe-se que proteínas de diferentes origens, viral ou endógena, são capazes de suprimir o silenciamento por RNA, mas o mecanismo de ação da maioria delas é ainda pouco compreendido. Um desses supressores endógenos é uma proteína do tipo calmodulina denominada rgs-CaM (regulator of gene silencing CaM) que foi identificada em plantas de tabaco. Calmodulinas são proteínas que desempenham papéis importantes na sinalização de cálcio em células eucarióticas e regulam a atividade de inúmeras proteínas com diversas funções celulares. No entanto, muito pouco se sabe as propriedades regulatórias da proteína rgs-CaM bem como sobre as suas possíveis interações protéicas. Desse modo, o presente trabalho tem como objetivo expressar em sistema heterólogo e purificar a proteína rgs-CaM de tabaco visando a realização de ensaios de interação protéica usando a metodologia de pull-down.